胃萎清治療慢性萎縮性胃炎的臨床療效及作用機(jī)制研究.pdf

1、背景:
　　慢性萎縮性胃炎是慢性胃炎的一種類(lèi)型，是指胃黏膜固有腺體出現(xiàn)萎縮，可伴有腸上皮化生及異型增生，帶來(lái)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生及社會(huì)問(wèn)題，嚴(yán)重影響患者社會(huì)工作能力及生存質(zhì)量。慢性萎縮性胃炎是慢性淺表性胃炎和胃癌之間的“橋梁”，是胃黏膜惡性轉(zhuǎn)變的關(guān)鍵階段，通過(guò)對(duì)慢性萎縮性胃炎機(jī)制的深入研究，不僅可以一定程度揭示炎癥導(dǎo)致炎性腫瘤的發(fā)病機(jī)理，更能實(shí)施針對(duì)性預(yù)防措施，降低胃癌的發(fā)病率及死亡率。胃萎清是我們臨床治療慢性萎縮性胃炎的經(jīng)驗(yàn)方，該方由

2、北芪，白術(shù)，半枝蓮，莪術(shù)，五指毛桃，枳殼組成，共奏健脾理氣，化瘀解毒的功效，以促進(jìn)臟腑功能恢復(fù)，改善患者的臨床癥狀為首務(wù)。
　　JAK2/STAT3信號(hào)通路和細(xì)胞增殖凋亡密切相關(guān)，活化的STAT3可以誘導(dǎo)Bcl-2、Bcl-xL基因的表達(dá)，從而抑制胃黏膜細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)胃黏膜慢性炎癥相關(guān)的胃癌發(fā)生，因此抑制JAK2/STAT3信號(hào)通路提供了一種防治胃癌發(fā)生的可能。本研究旨在評(píng)估胃萎清顆粒治療慢性萎縮性胃炎的臨床有效性及安全性，同時(shí)

3、以JAK2/STAT3信號(hào)通路為切入點(diǎn)，分析胃萎清對(duì)慢性萎縮性胃炎(CAG)大鼠的作用機(jī)制，進(jìn)一步揭示胃萎清改善慢性萎縮性胃炎病理的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　目的:
　　(1)評(píng)估胃萎清顆粒治療慢性萎縮性胃炎患者的臨床有效性及安全性。
　　(2)本實(shí)驗(yàn)用MNNG配合饑飽失常建立慢性萎縮性胃炎的大鼠模型，觀察胃萎清顆粒對(duì)慢性萎縮性胃炎大鼠一般情況的影響，同時(shí)胃萎清對(duì)慢性萎縮性胃炎大鼠腺體萎縮、腸上皮化生的治療效果。
　

4、　(3)探討通過(guò)觀察JAK2/STAT3信號(hào)通路在慢性萎縮性胃炎中的表達(dá)情況，探討胃萎清顆粒對(duì)JAK2/STAT3信號(hào)通路關(guān)鍵因子的調(diào)控作用。
　　方法:
　　(1)臨床研究:納入慢性萎縮性胃炎患者，隨機(jī)分為胃萎清組和葉酸組，胃萎清組予胃萎清顆粒劑，1次1包，1日3次。葉酸組予葉酸片，1次5mg，1日3次。給藥24周后復(fù)查胃鏡及病理，評(píng)估組間胃黏膜萎縮、腸化、異型增生、慢性炎癥、活動(dòng)性的治療前后改變。并且評(píng)估組間上腹（胃脘）

5、疼痛、上腹（胃脘）脹悶、上腹（胃脘）堵悶、燒心、反酸、噯氣、食欲減退、食量減少各單項(xiàng)癥狀積分及癥狀總積分的治療前后改變情況。
　　(2)實(shí)驗(yàn)研究:70-80天SPF級(jí)SD雄性大鼠94只，體重170-200克，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為2組，即:空白組，慢性萎縮性胃炎模型組。空白組14只，慢性萎縮性胃炎模型組80只?？瞻捉M給予正常飲食，自由飲水。慢性萎縮性胃炎模型組予180μg/mL的MNNG飲用液自由飲用，結(jié)合饑飽失常法復(fù)制慢性萎

6、縮性胃炎大鼠模型，連續(xù)造模至第14周，隨機(jī)抽取2只慢性萎縮性胃炎模型組老鼠，進(jìn)行胃黏膜病理形態(tài)組學(xué)檢查，兩只大鼠病理結(jié)果均顯示為胃黏膜固有腺體萎縮伴腸上皮化生，表明造模成功。造模成功后將慢性萎縮性胃炎模型組隨機(jī)分為5組:模型組，胃萎清高劑量組，胃萎清中劑量組，胃萎清低劑量組，葉酸組。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予生理鹽水灌胃。胃萎清高、中、低劑量組灌胃給藥濃度分別為15.6g/kg/d、7.8g/kg/d、3.9g/kg/d。葉酸組給藥濃度

7、為1.46mg/kg/d。灌胃容積10ml/kg，每日1次，連續(xù)灌胃10周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取小彎側(cè)胃體一竇交界處胃黏膜，制備胃黏膜上皮組織切片。HE染色法觀察各組大鼠胃黏膜上皮萎縮、腸上皮化生情況。AB-PAS染色法觀察各組大鼠胃黏膜上皮腸上皮化生病變范圍;刮取剩余大鼠胃黏膜，Western Blot法檢測(cè)JAK2、STAT3、p-STAT3的表達(dá)。RT-PCR法檢測(cè)Bcl-2、Bcl-xL的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)臨床研

8、究:本試驗(yàn)共入組64例，治療組34例，對(duì)照30例。其中2例治療組患者脫落，總共62例患者參與數(shù)據(jù)分析。
　?、俨±矸矫?，胃萎清對(duì)慢性炎癥積分改善的效果優(yōu)于葉酸組。
　?、谠谥饕Y狀積分改善方面，治療組在改善上腹（胃脘）疼痛方面效果優(yōu)于對(duì)照組，對(duì)照組在治療上腹（胃脘）脹滿方面效果優(yōu)于治療組，其它方面積分治療組與對(duì)照組對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(2)實(shí)驗(yàn)研究:
　　①HE染色顯示模型組胃黏膜腺體大部分萎縮消失，粘

9、膜肌層增厚，間質(zhì)內(nèi)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，淋巴濾泡形成，可見(jiàn)腸上皮化生。有不同程度的變性或壞死的脫落細(xì)胞，粘膜層變薄，腺體細(xì)胞排列紊亂，腺體呈囊狀擴(kuò)張，上皮細(xì)胞形態(tài)大小不一，間質(zhì)水腫、充血。胃黏膜全層出現(xiàn)腸上皮化生，可見(jiàn)大量杯狀細(xì)胞。葉酸組大鼠胃黏膜呈粉紅色，光澤度差，胃黏膜變薄、皺襞紊亂，見(jiàn)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。間質(zhì)水腫、充血、炎細(xì)胞浸潤(rùn)，區(qū)域粘膜可見(jiàn)大量腸上皮化生。胃萎清三個(gè)劑量組病理介于葉酸與空白組之間，其中以胃萎清高劑量組病理改善最明顯，胃萎

10、清中劑量組次之，胃萎清低劑量組病理改善效果不明顯。AB-PAS染色顯示正常組大鼠胃黏膜上皮無(wú)藍(lán)色或紫色腸上皮化生灶;模型組出現(xiàn)彌漫性腸上皮化生，胃萎清治療后，則主要集中在胃腔側(cè)的細(xì)胞，其中以胃萎清高劑量組和中劑量組改善最明顯，葉酸組改善不明顯;
　　②JAK2蛋白在模型組的表達(dá)最高，其中胃萎清高劑量組和胃萎清中劑量組表達(dá)較模型組降低。STAT3蛋白在模型組的表達(dá)最高，胃萎清三個(gè)劑量組表達(dá)較模型組降低，其中高劑量組降低最明顯。p-S

11、TAT3蛋白在模型組的表達(dá)最高，胃萎清三個(gè)劑量組表達(dá)較模型組降低，其中胃萎清高劑量組較模型組降低最明顯。和模型組比較，胃萎清高劑量組Bcl-2 mRNA表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。和模型組比較，胃萎清高劑量組Bcl-xL mRNA表達(dá)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　(1)胃萎清可改善患者病理的慢性炎癥積分。同時(shí)胃萎清可改善上腹（胃脘）疼痛。這為胃萎清治療慢性萎縮性胃炎提供臨床證據(jù)。<