RGS20基因在三陰性乳腺癌中的作用及其機制的研究.pdf

1、研究目的:
　　目前，乳腺癌已經(jīng)成為全球女性最常見的惡性腫瘤，也是第二大導致女性死亡的腫瘤。三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)是一類雌、孕激素受體陰性和人類表皮生長因子（Her-2）不表達的乳腺癌亞型，占所有浸潤性乳腺癌的10-20％。然而，三陰性乳腺癌是目前乳腺癌治療領域的難題，其靶向治療的缺乏以及三陰性乳腺癌的不良預后都促使人們更努力地去尋找可行的分子靶點以治療這些腫瘤患者。近

2、年來，隨著基因“組學”技術(shù)的進步和廣泛應用，國內(nèi)外越來越多的研究機構(gòu)陸續(xù)開展腫瘤測序數(shù)據(jù)庫的構(gòu)建，并且正在發(fā)掘一些可在三陰性乳腺癌鑒定中應用的潛在分子特征。本研究旨在通過分析乳腺癌的測序數(shù)據(jù)庫，探索并驗證三陰性乳腺癌中可能存在的分子靶標。
　　研究方法:
　　1.通過生物信息學的方法分析TCGA乳腺癌數(shù)據(jù)庫，篩選出三陰性乳腺癌特異性分子指標RGS20基因。
　　2.通過real time PCR檢測30例三陰性乳腺癌（

3、癌及癌旁配對）標本，檢測RGS20基因mRNA的表達水平。
　　3.入組86例構(gòu)建三陰性乳腺癌組織芯片(TMA)，通過免疫組化技術(shù)檢測RGS20基因的蛋白表達水平，來探索RGS20基因與三陰性乳腺癌的臨床病理特征之間的關(guān)系。
　　4.通過K-M plot數(shù)據(jù)庫的生存分析，進一步探索RGS20基因?qū)θ幮匀橄侔┑念A后影響。
　　5.構(gòu)建RGS20基因高表達的慢病毒及其siRNA，通過過表達及抑制等實驗，分析RGS20基因

4、對三陰性乳腺癌細胞系的影響，探索其可能的機制。
　　研究內(nèi)容:
　　1.TCGA數(shù)據(jù)分析，RGS20基因在三陰性乳腺癌組織中的表達明顯高于癌旁組織，且在三陰性乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病例中呈現(xiàn)高表達。
　　2.結(jié)合TCGA數(shù)據(jù)庫分析及real time PCR分析，RGS20基因在三陰性乳腺癌的癌組織中表達顯著高于癌旁對照組織。
　　3.對86例三陰性乳腺癌組織芯片分析，發(fā)現(xiàn)RGS20基因表達陽性病例其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風險更

5、高，ki-67增殖系數(shù)更高，以及有著更差的N分期和臨床分期。
　　4.K-Mplot的生存分析提示RGS20基因高表達的三陰性乳腺癌患者其無復發(fā)生存(relapse free survival，RFS)較低。
　　5.細胞功能學實驗發(fā)現(xiàn)，RGS20基因具有促進三陰性乳腺癌細胞增殖以及侵襲的能力。
　　主要結(jié)論:
　　1.與其他分子類型乳腺癌相比，RGS20基因在三陰性乳腺癌中具有特異性的高表達，因此，其可能是三陰