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文檔簡介
1、在男性泌尿生殖系統(tǒng)中,前列腺癌是常見的惡性腫瘤。隨著社會的的發(fā)展,人口老齡化及生活習(xí)慣等發(fā)生改變,包括中國在內(nèi)的亞洲地區(qū),前列腺癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢,已位居該地區(qū)泌尿系腫瘤的第二位。目前研究已經(jīng)提示前列腺癌發(fā)生及發(fā)展的病理進程與雄激素受體(AR)密切相關(guān),前列腺癌細(xì)胞惡性程度增加,其雄激素受體的表達減少;早期前列腺癌組織中雄激素受體的表達高于晚期,高度及中度分化的前列腺癌組織中雄激素受體的表達高于低分化前列腺癌。研究發(fā)現(xiàn)上皮來源的惡性
2、腫瘤細(xì)胞可分泌免疫球蛋白G(IgG),并具有促進腫瘤細(xì)胞生長、遷移的作用。在前期研究中,我們發(fā)現(xiàn)前列腺癌中表達IgG,其表達隨著前列腺癌惡性程度增加而增高,提示IgG可能在前列腺癌發(fā)病過程中起重要作用。那么,前列腺癌AR與IgG之間是否存在相關(guān)性及其作用機制?目前國內(nèi)外尚未有相關(guān)研究報道。我們擬通過干預(yù)前列腺癌細(xì)胞株中AR的表達,檢測IgG表達及前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移等生物學(xué)特性的變化,明確前列腺癌AR與IgG之間關(guān)系。
研究
3、目的:
研究調(diào)控前列腺癌細(xì)胞中AR對IgG表達的影響,及對前列腺癌細(xì)胞增殖、遷移的作用。
研究方法:
(1)Western blot分別檢測雄激素依賴性前列腺癌細(xì)胞株LNCap細(xì)胞及去勢抵抗性前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3細(xì)胞中AR及IgG蛋白的表達。
(2)構(gòu)建細(xì)胞模型
AR基因(pCDNA3.1+)轉(zhuǎn)染PC-3構(gòu)建AR過表達的PC-3-AR細(xì)胞,沉默LNCap中AR基因表達構(gòu)建LNCap-s
4、iAR細(xì)胞。
(3)檢測相關(guān)指標(biāo)
Western blot檢測AR及IgG表達量;Q-PCR檢測細(xì)胞株中IgG mRNA表達量;四氮甲基唑氮(MTT)、細(xì)胞劃痕方法檢測細(xì)胞的增殖及遷移能力。
(4)統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,數(shù)據(jù)用x±s表示,PC-3,PC-3-V,PC-3-AR及LNCap,LNCap-siCon,LNCap-siAR多組細(xì)胞間IgG mRNA及蛋白表
5、達量采用單因素方差分析(采用Bonferroni方法),檢驗水準(zhǔn)α=0.05。
研究結(jié)果:
(1)LNCap細(xì)胞與PC-3細(xì)胞相比較,AR高表達,IgG低表達(P<0.05)。
(2)PC-3細(xì)胞轉(zhuǎn)染AR基因后,AR表達增高,PC-3-AR細(xì)胞較PC-3細(xì)胞低表達IgG mRNA、IgG蛋白,PC-3-AR細(xì)胞較PC-3細(xì)胞增殖、遷移能力減弱(p<0.01)。LNCap細(xì)胞沉默AR基因后,AR蛋白表達降低,
6、LNCap-siAR細(xì)胞較LNCap細(xì)胞高表達IgG mRNA及IgG蛋白,LNCap-siAR細(xì)胞較LNCap細(xì)胞增殖、遷移能力增強(p<0.01)。
研究結(jié)論:
調(diào)控前列腺癌細(xì)胞AR可影響IgG蛋白的表達,并使其增殖、遷移能力發(fā)生改變。上調(diào)前列腺癌細(xì)胞AR的表達可導(dǎo)致IgG低表達,腫瘤細(xì)胞增殖、遷移能力減弱,腫瘤惡性程度降低。沉默前列腺癌細(xì)胞AR的表達可導(dǎo)致IgG高表達,腫瘤細(xì)胞增殖、遷移能力增強,腫瘤惡性程度增
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