阿霉素聯(lián)合二甲雙胍應(yīng)用對(duì)人舌癌細(xì)胞SCC-15侵襲遷移能力影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景:舌癌是口腔頜面部最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，多數(shù)為鱗狀上皮細(xì)胞癌，惡性程度高，生長(zhǎng)快，浸潤(rùn)性強(qiáng)，在發(fā)病早期即出現(xiàn)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，且易復(fù)發(fā)，預(yù)后較差;嚴(yán)重影響人類(lèi)的身體健康和生活質(zhì)量。目前舌癌的主要治療手段是以手術(shù)擴(kuò)大切除病灶為主并輔助放化療治療的綜合序列治療，盡管如此，舌癌的轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)率仍然較高，成為了舌癌治療的重點(diǎn)難點(diǎn);阿霉素是臨床常用的廣譜抗腫瘤藥物，也是臨床上用于頭頸部鱗狀細(xì)胞癌化療的首選藥物之一，臨床化療應(yīng)用中容易產(chǎn)生耐藥且隨著

2、藥物劑量的增加其不良反應(yīng)的嚴(yán)重程度也隨之增加，這些都限制了惡性腫瘤的化療效果;近年來(lái)的觀察及研究發(fā)現(xiàn)廣泛應(yīng)用于Ⅱ型糖尿病治療的藥物二甲雙胍具有抗腫瘤作用，其藥物安全性高耐受性好，相關(guān)研究表明其與多種常用化療藥物聯(lián)合使用既能降低化療藥物使用劑量又能達(dá)到更好的抗癌作用效果。
　　目的:應(yīng)用阿霉素聯(lián)合二甲雙胍處理體外培養(yǎng)的人舌癌細(xì)胞，觀察阿霉素聯(lián)合二甲雙胍用藥與其二者單獨(dú)用藥相比對(duì)人舌癌細(xì)胞SCC-15侵襲、遷移能力等方面的影響，并初步

3、探討其可能的機(jī)制，為指導(dǎo)舌癌患者術(shù)后化療用藥提供理論依據(jù)，以期提高舌癌患者術(shù)后生存率。
　　方法:體外常規(guī)培養(yǎng)人舌癌SCC-15細(xì)胞，給予阿霉素、二甲雙胍及阿霉素聯(lián)合二甲雙胍進(jìn)行干預(yù)作為實(shí)驗(yàn)組，無(wú)藥物處理作為對(duì)照組。采用MTT法檢測(cè)對(duì)照組及各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活率的影響;平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)照組及各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的體外克隆形成能力;Transwell侵襲小室實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)照組及各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的體外侵襲能力;劃痕-愈合實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)照組及各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞

4、的體外遷移能力;qRT-PCR檢測(cè)并比較對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)金屬基質(zhì)蛋白酶MMP-2、MMP-9 mRNA的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.人舌癌細(xì)胞SCC-15的存活率隨著阿霉素或二甲雙胍濃度的遞增而逐漸下降，與對(duì)照組相比，不同濃度阿霉素處理組24、48、72h的F值分別97.641、115.999、128.524;不同濃度二甲雙胍處理組24、48、72h的F值分別152.638、293.524、279.923;與阿霉素

5、或者二甲雙胍單獨(dú)用藥相比，二者聯(lián)合應(yīng)用則更為顯著的降低SCC-15細(xì)胞的存活率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.阿霉素、二甲雙胍均能抑制舌癌細(xì)胞SCC-15的體外克隆形成能力，與對(duì)照組相比，t值分別為-6.242和-14.519;與阿霉素或二甲雙胍單獨(dú)用藥相比，二者聯(lián)合應(yīng)用則更顯著抑制SCC-15細(xì)胞的體外克隆形成能力，t值分別為-21.354和-13.610。
　　3.與對(duì)照組相比，在體外條件下0.05mg/L ADM能促進(jìn)人

6、舌癌SCC-15細(xì)胞的侵襲和遷移能力，t值分別為3.395和4.881;二甲雙胍（5mmol/L MET）則能抑制人舌癌SCC-15細(xì)胞的侵襲和遷移能力，t值分別為-4.593和-7.273;與阿霉素、二甲雙胍單獨(dú)用藥組相比兩藥聯(lián)合應(yīng)用（0.05mg/L ADM+5mmol/L MET）更為顯著的抑制人舌癌SCC-15細(xì)胞的侵襲和遷移能力t值分別為-18.908、-23.655和-5.191、-6.592。
　　4.與對(duì)照組相比，

7、阿霉素處理組細(xì)胞內(nèi)MMP-2、MMP-9 mRNA的相對(duì)表達(dá)量增加，t值分別為32.659、43.246;二甲雙胍處理組細(xì)胞內(nèi)MMP-2、MMP-9 mRNA的相對(duì)表達(dá)量則明顯降低，t值分別為-23.989、-32.217;與阿霉素、二甲雙胍單獨(dú)用藥組相比兩藥聯(lián)合應(yīng)用處理組細(xì)胞內(nèi)MMP-2、 MMP-9 mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著降低，t值分別為-33.352、-6.669和-67.214、-29.973。
　　結(jié)論:
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