胰島素樣生長(zhǎng)因子-1介導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)限制所致胎兒生長(zhǎng)受限中的胎盤機(jī)制初步研究.pdf

1、本文從以下兩個(gè)部分闡述了胰島素樣生長(zhǎng)因子--1介導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)限制所致胎兒生長(zhǎng)受限中的胎盤機(jī)制初步研究
　　第一部分 孕期營(yíng)養(yǎng)限制誘導(dǎo)FGR大鼠模型中胎盤IGF1、IGFBP3的改變
　　研究目的：
　　通過孕期營(yíng)養(yǎng)限制誘導(dǎo)FGR大鼠模型，探討營(yíng)養(yǎng)限制對(duì)大鼠胎盤IGF1、IGFBP3表達(dá)的影響以及其與FGR發(fā)病之間的關(guān)系。
　　研究方法：
　　1.首先，通過孕期蛋白飲食限制（8％蛋白）建立營(yíng)養(yǎng)限制條件，構(gòu)建FGR大

2、鼠模型，觀察營(yíng)養(yǎng)限制對(duì)大鼠子代及胎盤發(fā)育的影響;
　　2.HE染色病理學(xué)檢查觀察營(yíng)養(yǎng)限制對(duì)胎盤發(fā)育與結(jié)構(gòu)的影響;
　　3.進(jìn)一步，通過熒光定量PCR檢測(cè)胎盤IGF1、IGFBP3mRNA表達(dá)水平，免疫組化方法檢測(cè)胎盤IGF1、IGFBP3蛋白表達(dá)。
　　研究結(jié)果：
　　1.孕期營(yíng)養(yǎng)限制顯著抑制胎鼠及胎盤發(fā)育，和對(duì)照組相比，營(yíng)養(yǎng)限制組子代GD19.5平均體重顯著下降，F(xiàn)GR率升高(P＜0.05);
　　2.胎

3、盤HE染色病理檢查發(fā)現(xiàn)，營(yíng)養(yǎng)限制組大鼠胎盤發(fā)育不良，迷路區(qū)變薄;
　　3.熒光定量PCR結(jié)果顯示，和對(duì)照組相比，營(yíng)養(yǎng)限制組胎盤IGF1、IGFBP3mRNA表達(dá)顯著下降(P＜0.05);
　　4.免疫組化結(jié)果顯示，大鼠胎盤部位IGF1及IGFBP3主要表達(dá)于基底層及迷路區(qū)滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿內(nèi)，和對(duì)照組相比，營(yíng)養(yǎng)限制組胎盤IGF1及IGFBP3表達(dá)下調(diào)。
　　研究結(jié)論：
　　孕期營(yíng)養(yǎng)限制抑制胎鼠及胎盤正常生長(zhǎng)發(fā)育，導(dǎo)致大

4、鼠胎盤部位滋養(yǎng)細(xì)胞IGF1及IGFBP3表達(dá)下調(diào)，可能影響胎盤正常結(jié)構(gòu)發(fā)育從而抑限制胎鼠生長(zhǎng)。
　　第二部分 血清限制對(duì)人滋養(yǎng)細(xì)胞株HTR-8/SVneo細(xì)胞IGF1表達(dá)及細(xì)胞侵襲力的影響
　　研究目的：
　　通過胎牛血清(Fetal Calf Serum，F(xiàn)BS)限制干預(yù)HTR-8/SVneo細(xì)胞模擬整體實(shí)驗(yàn)，探討FBS限制對(duì)HTR-8/SVneo細(xì)胞IGF1及細(xì)胞侵襲力表達(dá)的影響。
　　研究方法：
　　

5、1.分別予低濃度FBS、中等濃度FBS及高濃度FBS處理HTR-8/SVneo細(xì)胞，熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞IGF1、IGFBP3mRNA表達(dá)水平，細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)HTR-8/SVneo細(xì)胞IGF1、IGFBP3蛋白表達(dá)，比較不同濃度FBS處理對(duì)HTR-8/SVneo細(xì)胞IGF1、IGFBP3的影響;
　　2.同前處理，檢測(cè)不同濃度FBS處理對(duì)HTR-8/SVneo細(xì)胞MMP2mRNA及蛋白表達(dá)的影響;Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)

6、檢測(cè)不同濃度FBS對(duì)HTR-8/SVneo細(xì)胞侵襲力的影響;
　　3.給予不同濃度rhIGF1處理HTR-8/SVneo細(xì)胞，CCK-8比色實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)rhIGF1對(duì)細(xì)胞增殖的影響;
　　4.給予rhIGF1處理HTR-8/SVneo細(xì)胞48小時(shí)后，熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞MMP2mRNA表達(dá)水平，細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞MMP2蛋白表達(dá)，Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)rhIGF1對(duì)細(xì)胞侵襲力的影響。
　　研究結(jié)果：

7、>　　1.FBS限制導(dǎo)致HTR8/SVneo細(xì)胞IGF1表達(dá)下調(diào)(P＜0.05);
　　2.低濃度FBS導(dǎo)致HTR8/SVneo細(xì)胞MMP2低表達(dá)(P＜0.05)，細(xì)胞侵襲力下降(P＜0.05);
　　3.rhIGF1能顯著上調(diào)HTR-8/SVneo細(xì)胞MMP2表達(dá)水平(P＜0.05)，促進(jìn)HTR-8/SVneo細(xì)胞增殖及侵襲(P＜0.05)。
　　研究結(jié)論：
　　FBS限制下調(diào)人滋養(yǎng)細(xì)胞株HTR-8/SVneo