丹紅注射液對腦缺血再灌注損傷的抑制作用研究.pdf

1、目的：研究丹紅注射液對大鼠腦組織中MMP-9與RhoA因子表達(dá)的影響，并探討丹紅注射液對腦缺血再灌注損傷大鼠神經(jīng)的修復(fù)及保護(hù)作用。
　　方法：采用線栓法制作改良的Zea-Longa法大鼠大腦中動脈缺血再灌注模型，首次實(shí)驗(yàn)設(shè)假手術(shù)組、模型組、丹參多酚酸組、紅花黃色素組、尼莫地平組、丹紅組。線栓阻塞大腦中動脈1.5h后拔出，再灌注3小時后尾靜脈注射給藥。神經(jīng)功能評分及激光多普勒血流儀評價造模效果，符合入組標(biāo)準(zhǔn)的大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模

2、型組、丹參多酚酸組、紅花黃色素、尼莫地平組、丹紅組。假手術(shù)組及模型組尾靜脈按等體積注射生理鹽水，藥物治療組分別按4mg/kg、9mg/kg、0.4mg/kg、3ml/kg尾靜脈注射。實(shí)驗(yàn)各組每日1次尾靜脈給藥，1周后取材。HE染色觀察病理形態(tài)學(xué)的變化；尼氏染色光鏡檢測尼氏小體表達(dá)量作為細(xì)胞活性的評判；免疫組化以及酶聯(lián)免疫吸附法檢測各組左側(cè)皮質(zhì)區(qū)MMP-9、RhoA因子表達(dá)情況。
　　結(jié)果：⑴大鼠神經(jīng)功能評分結(jié)果：與假手術(shù)組比較，模

3、型組得分顯著增高（P＜0.05）；與模型組比較，丹紅組及其它各治療組顯著降低（P＜0.05），大鼠神經(jīng)功能明顯改善；與其它各治療組比較，丹紅組顯著降低（P＜0.05）。⑵HE病理染色：假手術(shù)組胞膜完整，核清晰。模型組出現(xiàn)明顯細(xì)胞水腫、脫失，各治療組大鼠病理組織結(jié)構(gòu)得到了不同程度的改善，其中丹紅組的腦組織結(jié)構(gòu)改善最為明顯，梗死神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目較假手術(shù)組輕微減少，胞膜完整，核清晰可見，壞死程度減輕，神經(jīng)細(xì)胞的病變有不同程度改變。⑶尼氏染色：假

4、手術(shù)組大鼠左側(cè)腦皮質(zhì)細(xì)胞尼氏小體顯示最多，模型組大鼠左側(cè)腦皮質(zhì)細(xì)胞尼氏小體則明顯減少。其他各治療組大鼠尼氏小體表達(dá)量均明顯高于模型組，以丹紅組最高，提示丹紅較之其他各治療組更有利于細(xì)胞活性的保護(hù)。⑷免疫組化：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠左腦組織MMP-9表達(dá)高于假手術(shù)組；與模型組比較，各組各治療組MMP-9明顯降低（P＜0.05）；丹紅組與各組比較，MMP-9表達(dá)低于其它各治療組（P＜0.05）；與假手術(shù)組比較，腦缺血再灌注模型組大鼠左腦

5、組織RhoA表達(dá)最高（P＜0.05）；與模型組比較，各組RhoA表達(dá)均低于模型組；丹紅組RhoA表達(dá)高于其它各治療組及假手術(shù)組（P＜0.05）；⑸酶聯(lián)免疫吸附測定法：與假手術(shù)組比較，模型組血清MMP-9含量明顯高于假手術(shù)組；與模型組比較，各治療組MMP-9明顯下降（P＜0.05）；丹紅組與各組比較，丹紅組血清MMP-9含量低于其它各治療組及模型組（P＜0.05）；與假手術(shù)組比較，模型組左側(cè)腦皮質(zhì)組織勻漿RhoA含量高于其它各組（P＜0.

6、05）；與模型組比較，各組RhoA表達(dá)均低于模型組；丹紅組高于其它各治療組及假手術(shù)組（P＜0.05）。
　　結(jié)論：①丹紅注射液能改善腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)功能缺損狀況及腦組織的病理結(jié)構(gòu)。②丹紅注射液可增加大鼠腦皮質(zhì)細(xì)胞尼氏小體表達(dá)量，對細(xì)胞具有保護(hù)作用。③免疫組化及Elisa顯示丹紅注射液通過提高RhoA表達(dá)和降低MMP-9的表達(dá)，抑制大鼠腦缺血再灌注的損傷，起到腦保護(hù)作用。丹紅注射液與其他藥物比較其對于腦缺血再灌注大鼠療效最佳，