巴沙魚皮膠原支架在兔顱骨缺損再生中的研究.pdf

1、研究目的:對(duì)巴沙魚皮的組成成分和性質(zhì)進(jìn)行分析，評(píng)估巴沙魚皮是否可作為膠原蛋白原來來源的可能性。利用凍干巴沙魚皮制備出一種主要成分為膠原蛋白的膜狀支架材料。分析該材料的相關(guān)理化性能，觀察該材料在兔顱骨缺損的引導(dǎo)骨再生術(shù)中的效果，分析其作為引導(dǎo)骨再生屏障膜的可行性，為巴沙魚皮膠原蛋白支架作為引導(dǎo)骨再生屏障膜應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)和可能性，以探索巴沙魚皮是否可以成為膠原支架材料的新來源。
　　研究方法:對(duì)來源于巴沙魚皮所提取的膠原蛋白進(jìn)

2、行成分分析和性質(zhì)的分析。對(duì)制備出的巴沙魚皮膠原支架進(jìn)行理化性能的檢測(cè)，主要有肉眼觀察材料的外形，掃描電鏡觀察和分析材料的結(jié)構(gòu)以及孔隙的大小和分布等，采用液體置換法測(cè)定巴沙魚皮膠原支架的孔隙率，使用萬能試驗(yàn)機(jī)測(cè)定材料的機(jī)械強(qiáng)度。根據(jù)其在磷酸緩沖液中浸泡28d后的失重率來測(cè)定該材料的體外降解率。測(cè)定該材料的吸水率并觀察該材料在濕潤(rùn)狀態(tài)下的溶脹情況。通過隨溫度變化導(dǎo)致膠原蛋白黏度變化的特點(diǎn)來測(cè)定材料的變性溫度。CCK-8細(xì)胞毒性試驗(yàn)檢測(cè)材料是

3、否對(duì)生物體有毒性。通過兔子顱骨缺損的引導(dǎo)骨再生實(shí)驗(yàn)初步判斷該材料作為引導(dǎo)骨再生屏障膜的作用效果和潛能。
　　結(jié)果:巴沙魚皮粗蛋白含量為95.20％;膠原蛋白類型主要為I型膠原;與其他魚類相比，巴沙魚皮膠原蛋白中所含的PrO和Hyp占全部氨基酸含量的比例最高;肉眼觀察厚薄均勻。掃描電鏡顯示材料為雙層結(jié)構(gòu)，一面疏松多孔，孔徑大小不一，分布均勻;另一面光滑，孔隙致密?？紫堵剩?5.50±1.94）％，厚度(0.66±0.10) mm，抗

4、拉強(qiáng)度(18.82±0.94) MPa。該材料28d的降解率為（80.22％±2.49），48h的吸水率為（379.77％±77.81）。巴沙魚皮膠原蛋白支架的變性溫度為34℃左右，經(jīng)過干熱交聯(lián)后的巴沙魚皮變性溫度可升高至35℃左右。在兔顱骨缺損再生實(shí)驗(yàn)中，巴沙魚皮膠原支架能起到引導(dǎo)骨再生的作用，在缺損區(qū)與皮膚黏膜等軟組織阻隔開，有效保護(hù)了缺損區(qū)域，阻擋了纖維細(xì)胞的長(zhǎng)入，同時(shí)為成骨過程提供了支架，促進(jìn)了再生組織內(nèi)的血管化。最終結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)

5、分析可以發(fā)現(xiàn)巴沙魚皮膠原支架的成骨效果較空白對(duì)照組好，比Bio-Gide膜組稍差，證明巴沙魚皮膠原支架具有一定的成骨能力。
　　結(jié)論:巴沙魚皮膠原蛋白支架理化性能穩(wěn)定，表面具有一定的孔隙率，且為雙層結(jié)構(gòu)，一面粗糙，有較多孔隙，一面光滑致密，符合作為屏障膜的基本結(jié)構(gòu)要求。吸水性適中，吸水后未見有明顯變形和溶解。穩(wěn)定性良好，降解速率與Bio-Gide膠原膜相比偏高。無細(xì)胞毒性，具有良好的生物相容性。在兔顱骨缺損再生術(shù)中可起到引導(dǎo)骨再生