糖尿病和糖尿病腎病患者血清lncRNA GAS5-miR-21ceRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的表達變化及意義.pdf

1、目的：檢測糖尿病和糖尿病腎病患者血清lncRNA GAS5和miR-21的表達變化，分析其與臨床和病理指標(biāo)的相關(guān)性，驗證lncRNA GAS5和miR-21在糖尿病和糖尿病腎病發(fā)病機制中的作用，能否作為新的治療靶點和診斷生物標(biāo)志物。
　　方法：入組人群分為3組，糖尿病腎病組:腎活檢病理診斷明確為糖尿病腎病的患者(n=25，男14例，女11例)，糖尿病組:尿微量白蛋白/尿肌酐正常的糖尿病患者(n=10，男4例，女6例)，正常對照組:

2、健康體檢者（n=9，男4例，女5例）。空腹采血，分離血清，采用TRIzol LS Reagent抽提RNA、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA、實時定量PCR對血清標(biāo)本中l(wèi)ncRNA GAS5及miR-21表達水平進行檢測。臨床指標(biāo)包括性別、年齡、24小時尿蛋白定量、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、血肌酐(Cr)、尿素氮(Urea)、胱抑素C(Cys-C)、血白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密

3、度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血尿酸(UA)、空腹血糖(FBG)、尿微量白蛋白/尿肌酐(UACR)，CKD-EPI公式計算eGFR。應(yīng)用T檢驗、Pearson、Spearman檢驗、多元線性回歸分析lncRNA GAS5及miR-21表達水平和各臨床指標(biāo)的相關(guān)性，單因素ANOVA方差分析檢驗lncRNA GAS5及miR-21在不同分組中的差異性，用ROC曲線下面積(AUC)評價lncRNA GAS5及miR-21在疾病中診斷效能。所有

4、數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計、GraphPad軟件處理，P＜0.05視為有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果：⑴糖尿病和糖尿病腎病患者血清lncRNA GAS5的表達水平均顯著低于正常對照組(P＜0.05)，而血清miR-21的表達水平顯著高于正常對照組(P＜0.05)。⑵糖尿病腎病患者中，隨著24小時尿蛋白定量的進展，血清lncRNA GAS5的表達逐漸上調(diào)(P=0.028)。隨著腎活檢病理分級的進展（Ⅱb-Ⅳ期），血清miR-21的表達逐

5、漸上調(diào)(P=0.038)。⑶FBG(r=-0.381，P=0.011)、HbA1c(r=-0.366，P=0.001)與血清lncRNA GAS5呈顯著負(fù)相關(guān)，并且FBG(β=-0.001，P=0.022)與血清lncRNAGAS5獨立相關(guān);尿MA（r=0.692，P＜0.001）、TC(r=0.400，P=0.007)、Cr(r=0.506，P＜0.001)、Urea(r=0.516, P＜0.001)、SBP(r=0.431, P=

6、0.003)與血清miR-21水平呈顯著正相關(guān);ALB(r=-0.510，P＜0.001)、eGFR(r=-0.536，P＜0.001)與血清miR-21水平呈顯著負(fù)相關(guān)，并且ALB(β=-0.054，P＜0.001)與血清miR-21獨立相關(guān)。⑷血清lncRNA GAS5、miR-21及l(fā)ncRNA GAS5/miR-21“診斷標(biāo)簽”診斷DM的價值較好(lncRNA GAS5的AUC=0.7302，p=0.03，cutoff值0.00

7、56，靈敏度為62.86％，特異度為77.78％; miR-21的AUC=0.8397，p=0.002，cutoff值0.6600，靈敏度為77.14％，特異度為77.78％;lncRNA GAS5/miR-21“診斷標(biāo)簽”的AUC=0.8984，p=0.0003，cutoff值1.101，靈敏度為85.71％，特異度為88.89％）。⑸血清miR-21及l(fā)ncRNA GAS5/miR-21“診斷標(biāo)簽”診斷DN的價值較好(miR-21的

8、AUC=0.9179，p＜0.0001，cutoff值0.99，靈敏度為76.00％，特異度為94.74％;lncRNA GAS5/miR-21“診斷標(biāo)簽”的AUC=0.9158，p＜0.0001，cutoff值-0.4523，靈敏度為88.00％，特異度為84.21％）。
　　結(jié)論：①與正常組相比，血清lncRNA GAS5在糖尿病組和糖尿病腎病組的表達顯著下調(diào)，而血清miR-21表達水平顯著上調(diào)。②空腹血糖、糖化血紅蛋白與血清

9、lncRNAGAS5呈顯著負(fù)相關(guān)，ROC曲線下的面積表明血清lncRNA GAS5在糖尿病中有較好的診斷效能。相對于單獨血清lncRNA GAS5，lncRNA GAS5/miR-21診斷標(biāo)簽診斷糖尿病靈敏度增加至85.71％，特異度增加至88.89％，可以作為診斷糖尿病的生物標(biāo)志物。③血清miR-21表達水平與尿微量白蛋白水平、腎功能下降、血清白蛋白的降低呈正相關(guān)。ROC曲線下的面積表明血清miR-21達到0.66時診斷糖尿病的敏感度