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文檔簡介
1、目的:觀察CXCL13對RANKL在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中的表達(dá)的影響,探討兩者在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中的相關(guān)性。
方法:第一部分實驗利用TNF-α處理正常關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞,應(yīng)用免疫熒光檢測滑膜細(xì)胞中CXCL13的表達(dá);第二部分實驗使用CXCL13處理骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞,運用蛋白免疫印跡分析方法檢測經(jīng)過CXCL13(不向濃度、不同時間)處理后的骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中RANKL蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:1.免疫熒光結(jié)果顯示CXCL13
2、在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中表達(dá)明顯低于正常人的滑膜細(xì)胞。2.利用TNF-α(濃度10ug/L)處理正常關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞,隨著作用時間的延長CXCl13表達(dá)呈現(xiàn)減弱趨勢。3.蛋白免疫印記檢測結(jié)果顯示:在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中RANKL蛋白的表達(dá)量明顯高于正常人滑膜細(xì)胞;經(jīng)TNF-α(濃度為10ng/ml)處理24h后,更換含有CXCL13(濃度25ng/ml)的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)1h、3h、6h、24h后,發(fā)現(xiàn)在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中RANKL蛋白表達(dá)水
3、平隨著時間的延長而降低。經(jīng)TNF-α(濃度10 ng/ml)處理24h后,在更換含有不同濃度的趨化因子CXCL13(0ng/ml、5ng/ml、15ng/ml、25ng/ml)培養(yǎng)液繼續(xù)處理24h后,RANKL蛋白的表達(dá)量隨著濃度的增加而降低。在骨性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞中RANKL的蛋白表達(dá)量隨著CXCl13刺激濃度的增加及作用時間的延長,呈現(xiàn)時間依賴性及濃度依賴性降低。
結(jié)論:CXCL13在一定濃度和時間能夠?qū)ANKL表達(dá)進(jìn)行抑
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