Pre-microRNA末端環(huán)內(nèi)的SNP影響結(jié)直腸癌發(fā)生的機(jī)制研究.pdf

1、第一部分Pre-microRNA末端環(huán)內(nèi)SNP與結(jié)直腸癌發(fā)生的相關(guān)性研究
　　【目的】研究microRNA前體的末端環(huán)內(nèi)SNP與結(jié)直腸癌易感性和臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性。
　　【方法】
　　1、篩選位于pre-miRNA末端環(huán)內(nèi)的SNPs，篩選其中MAF≥0.1的作為候選SNPs；
　　2、收集1026例結(jié)直腸癌病人和1026例對照組的外周血樣，從中提取DNA；
　　3、采用MassARRAY SNP基因分

2、型平臺高通量質(zhì)譜分型；
　　4、統(tǒng)計(jì)分析SNP基因型與結(jié)直腸癌發(fā)病率和臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。
　　【結(jié)果】
　　1、在miRNASNP2.0數(shù)據(jù)庫中共找到121個位于pre-miRNA末端環(huán)的SNPs，其中17個SNPs的MAF≥0.1。
　　2、高通量質(zhì)譜分型平臺成功測出樣本中7個SNPs位點(diǎn)的基因型。
　　3、統(tǒng)計(jì)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，rs7911488與結(jié)直腸癌發(fā)病顯著相關(guān)，C等位基因型是腸癌發(fā)生的危險因子。<

3、br>　　4、該位點(diǎn)與腫瘤最大直徑相關(guān)。
　　【結(jié)論】rs7911488與結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展顯著相關(guān)，C等位基因型是腸癌發(fā)生的危險因子。
　　第二部分 miRSNP rs7911488對miRNA及其調(diào)控作用的影響
　　【目的】探索rs7911488影響結(jié)直腸癌發(fā)生的機(jī)制。
　　【方法】
　　1、測定腸癌組織樣本的rs7911488位點(diǎn)基因型和miR-1307表達(dá)水平；
　　2、軟件預(yù)測可能與pre-m

4、iR-1307結(jié)合的蛋白，并驗(yàn)證rs7911488對結(jié)合蛋白的影響；
　　3、軟件預(yù)測并驗(yàn)證miR-1307的下游靶基因。
　　【結(jié)果】
　　1、腸癌組織中miR-1307低表達(dá)，與rs7911488位點(diǎn)的C等位基因型相關(guān)。
　　2、MBNL1可與C基因型的pre-miR-1307結(jié)合，導(dǎo)致DICER1無法與之結(jié)合，導(dǎo)致miR-1307表達(dá)下調(diào)。
　　3、抗凋亡蛋白Bcl2是miR-1307的直接靶基因，m

5、iR-1307的低表達(dá)導(dǎo)致Bcl2表達(dá)上調(diào)，個體患結(jié)直腸癌風(fēng)險上升。
　　【結(jié)論】rs7911488 C等位基因型pre-miR-1307與MBNL1結(jié)合，影響了DICER1的正常作用，使得成熟miR-1307表達(dá)量下降，從而導(dǎo)致Bcl2表達(dá)上調(diào)，個體患結(jié)直腸癌風(fēng)險上升。
　　小結(jié)
　　本論文通過研究pre-miRNA末端環(huán)上單核苷酸多態(tài)性與結(jié)直腸癌易感性之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)位于pre-miR-1307末端環(huán)上SNP r