1,25(OH)2D3激活P38MAPK信號通路誘導(dǎo)2型糖尿病伴牙周炎患者中性粒細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制.pdf

1、目的：
　　觀察1，25-二羥維生素D3(1，25(OH)2D3)對2型糖尿病伴牙周炎患者中性粒細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)因子caspase-3,bax,bcl-2表達(dá)情況，探討p38MAPK信號通路在1，25(OH)2D3對2型糖尿病伴牙周炎患者中性性粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制。
　　方法：
　　2015年9月至2016年7月收集遵義市遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科有2型糖尿病并伴有牙周炎患者76例（男52例，女24例），采集患者外周

2、血10ml，采用密度梯度離心法分離中性粒細(xì)胞，分為空白組（control組）、1,25(OH)2D3誘導(dǎo)組（medication組）、1,25(OH)2D3＋SB203580D誘導(dǎo)組（medication＋blocker組），使用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）觀察細(xì)胞凋亡情況,蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（Western Blot）檢測p38MAPK信號通路相關(guān)蛋白p38、p-p38，凋亡蛋白 caspase-3、bax、bcl-2的表達(dá)；實(shí)時(shí)定量PCR(RT

3、-PCR)檢測p38、caspase-3、bax/bcl-2mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.FCM結(jié)果顯示：通過使用濃度為10-8mol/L的1,25(OH)2D3作用于細(xì)胞24小時(shí)后，medication組凋亡率最高，medication組及medication＋blocker組凋亡率均高于control組，兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　2.Western Blot結(jié)果顯示：1,25(OH)2D

4、3作用后，medication組磷酸化p38（p-p38）、caspase-3及bax蛋白表達(dá)最高，其次為medication＋blocker組，control組最低，bcl-2蛋白的表達(dá)medication組灰度值最低，其次為medication＋blocker組，control組最高。
　　3.RT-PCR結(jié)果顯示：control組、medication組、medication＋blocker組p38mRNA水平組間比較無統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)差異（P＞0.05）；caspase-3、bax/bcl-2的mRNA水平在medication組高于control組和medication＋blocker組，medication＋blocker組高于control組，組間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.1,25(OH)2D3可通過激活P38MAPK信號通路誘導(dǎo)2型糖尿病伴慢性牙周炎患者中性粒細(xì)胞的凋亡。
　　2.1,25(OH)2D3