不同微環(huán)境下人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞影響的差異性研究.pdf

1、瘢痕是創(chuàng)面過度愈合的結(jié)果，也是人類特有的纖維化代謝性疾病，發(fā)病機(jī)制尚未明確。增生性瘢痕(HTS)不僅影響患者美觀，還會(huì)引起不同程度肢體功能障礙，是臨床亟待解決的難題之一。隨著對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的認(rèn)識(shí)和發(fā)展，采用MSCs作為治療瘢痕創(chuàng)面的細(xì)胞療法，已經(jīng)成為新的研究熱點(diǎn)。目前骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞用于促進(jìn)動(dòng)物創(chuàng)面愈合的研究較多，但其對(duì)瘢痕創(chuàng)面的治療效果尚存在爭(zhēng)議。本組研究以及國內(nèi)外學(xué)者的新近研究表明，增生性瘢痕的形成與干細(xì)胞及其微環(huán)境有關(guān)

2、，因此應(yīng)用干細(xì)胞直接修復(fù)創(chuàng)面過度愈合的手段及其機(jī)制值得進(jìn)一步深入探討。增生性瘢痕形成過程中的微環(huán)境促使成纖維細(xì)胞發(fā)生異質(zhì)性變化，我們推測(cè)不同時(shí)期成纖維細(xì)胞的這種變化也在一定程度上反映著增生性瘢痕發(fā)生發(fā)展過程中微環(huán)境的變化情況。本課題旨在探討瘢痕形成過程中成纖維細(xì)胞的變化，并以此作為不同微環(huán)境來培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，探討微環(huán)境對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分泌功能的影響，待篩選出關(guān)鍵蛋白后，再應(yīng)用基因敲除技術(shù)來驗(yàn)證不同微環(huán)境下人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)成纖

3、維細(xì)胞的作用和對(duì)創(chuàng)面愈合的影響，以期望能夠從正向和逆向的角度分別揭示骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在創(chuàng)面正常愈合或瘢痕愈合中的作用。
　　主要結(jié)果和結(jié)論:
　　1.一般體外培養(yǎng)的人正常皮膚成纖維細(xì)胞與增生性瘢痕成纖維細(xì)胞從形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)增殖等方面無明顯差異。
　　2.采用條件培養(yǎng)基模擬增生性瘢痕及正常皮膚微環(huán)境重復(fù)性好，操作簡(jiǎn)便因而具有可行性。
　　3.人正常皮膚成纖維細(xì)胞在經(jīng)瘢痕形成條件培養(yǎng)基作用后植入裸鼠皮下能夠形成瘢痕瘤

4、狀物，而在正常條件培養(yǎng)基作用下未見瘢痕形成，進(jìn)一步說明瘢痕形成條件培養(yǎng)基的作用及其對(duì)成纖維細(xì)胞的影響。
　　4.HBM-MSCs在不同微環(huán)境下分泌的細(xì)胞因子存在差異，其中RANTES、IL-6、TNF-α、MIP-1-α及TGF-β3等因子差異性顯著。其中趨化因子RANTES差異性最大，而與纖維化相關(guān)的TGF-β1/TGF-β3也存在明顯差異。
　　5.在共培養(yǎng)條件下，HBM-MSCs對(duì)在瘢痕形成微環(huán)境作用下的威纖維細(xì)胞的增

5、殖及膠原合成是促進(jìn)作用，而同樣條件下用RANTES siRNA的HBM-MSCs對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖及膠原合成促進(jìn)作用明顯降低，降低了其瘢痕形成的可能性。
　　成纖維細(xì)胞在瘢痕形成微環(huán)境下會(huì)向瘢痕愈合轉(zhuǎn)歸，說明成纖維細(xì)胞的變化也在一定程度上受創(chuàng)面愈合微環(huán)境的影響。HBM-MSCs隨著創(chuàng)面愈合微環(huán)境變化其分泌功能發(fā)生改變，在瘢痕愈合的微環(huán)境下HBM-MSCs會(huì)加重瘢痕愈合。趨化因子RANTES在創(chuàng)面愈合中HBM-MSCs對(duì)于成纖維細(xì)胞