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文檔簡介
1、目的:
1.檢測小窩蛋白-1(Cav-1)和E-鈣粘蛋白(E-cad)在食管癌TE1細胞株中的表達水平。
2.探討Cav-1在食管癌轉移中的作用及相關的分子機制。
方法:
1.用含10%胎牛血清,1%青霉素和1%鏈霉素的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人食管癌TE1細胞株。
2.化學合成針對 Cav-1基因3個不同靶點的3條 siRNA(Cav-1 siRNA1, Cav-1 siRNA2和陰性對
2、照siRNA),分別轉染食管癌TE1細胞株,以未轉染細胞為空白對照,轉染陰性 siRNA細胞為陰性對照。
3.用Western blot方法檢測轉染后人食管癌TE1細胞株中Cav-1及E-cad的表達水平。
4.采用Transwell方法檢測轉染后各組細胞的遷移、侵襲能力。
結果:
1.Cav-1 siRNA使食管癌TE1細胞株中Cav-1表達水平降低,E-cad表達水平升高。
2.轉染
3、后 Cav-1 siRNA1組和 Cav-1 siRNA2組Cav-1的表達量與空白對照組比較p=0.0001,差異均有統(tǒng)計學意義;陰性對照組和空白對照組比較p=0.2768,差異無統(tǒng)計學意義。
3.轉染后Cav-1 siRNA1組和Cav-1 siRNA2組E-cad的表達量與空白對照組比較,p分別=0.0091和0.0403,差異均有統(tǒng)計學意義;陰性對照組和空白對照組比較p=0.5804,差異無統(tǒng)計學意義。
4.
4、轉染Cav-1 siRNA后食管癌TE1細胞株的遷移、侵襲能力明顯降低,Cav-1 siRNA1組和Cav-1 siRNA2組細胞的遷移、侵襲能力相比空白對照組顯著減弱,差異有統(tǒng)計學意義。
5.轉染Cav-1 siRNA后Cav-1 siRNA1組的遷移、侵襲能力比Cav-1 siRNA2組弱。
結論:
1.在食管癌TE1細胞株中轉染Cav-1 siRNA能有效降低Cav-1表達水平并減弱細胞的遷移、侵襲能
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