從痰論治癡呆及石菖蒲對(duì)擬AD大鼠模型的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　從痰濁角度探討老年性癡呆(AD)的發(fā)病機(jī)理和治療法則，并通過觀察石菖蒲及其揮發(fā)油成分對(duì) AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶水平、膽堿能系統(tǒng)功能、神經(jīng)生長(zhǎng)因子水平和神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響，探討石菖蒲對(duì)AD模型的干預(yù)作用及物質(zhì)基礎(chǔ)，為中醫(yī)藥防治AD提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　Wistar大鼠70只，隨機(jī)分為7組，即正常組、假手術(shù)組、模型組、多奈哌齊組（0.33mg? kg-1? d-1）、石菖蒲水煎液組（20mg? kg-1

2、? d-1）、石菖蒲揮發(fā)油組（20mg? kg-1? d-1）、β-細(xì)辛醚組（25 mg?kg-1? d-1），每組10只。大鼠海馬注射Aβ1-42構(gòu)建擬AD大鼠模型，各組大鼠均按1ml/100g2d灌胃給藥，連續(xù)28d。采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)觀察實(shí)驗(yàn)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，放射免疫法檢測(cè)大鼠海馬 Ach、AchE和ChAT活性變化，ELISA法檢測(cè)海馬組織 NGF含量，流式細(xì)胞儀檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡率。
　　結(jié)果：
　　1.歷時(shí)

3、5天的定位航行實(shí)驗(yàn)中，各組大鼠的逃避潛伏期總體呈下降趨勢(shì)，前2天各組間沒有顯著差異。第3天，模型組大鼠的逃避潛伏期與正常組相比明顯延長(zhǎng)（P<0.05)，石菖蒲揮發(fā)油組、多奈哌齊組和β-細(xì)辛醚組與模型組比有顯著差異（P<0.05)；第4天，多奈哌齊組、石菖蒲揮發(fā)油組、β-細(xì)辛醚組與模型組相比逃避潛伏期顯著縮短(P<0.01)；第5天，各用藥組與模型組相比逃避潛伏期顯著縮短（P<0.01)。
　　2.第6天空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，模型組

4、目標(biāo)象限游泳時(shí)間占整個(gè)游泳時(shí)間的百分比與正常組相比明顯縮短，空間搜索能力顯著下降(P<0.01)。多奈哌齊組、石菖蒲水煎液組、石菖蒲揮發(fā)油組、β-細(xì)辛醚組與模型組相比平臺(tái)象限比顯著增長(zhǎng)（P<0.01)，其中石菖蒲揮發(fā)油組已接近正常水平（P>0.05)。各組大鼠在跨過原平臺(tái)位置次數(shù)結(jié)果顯示，模型組較其它各組大鼠跨過原平臺(tái)位置次數(shù)明顯下降(P<0.01)。多奈哌齊組、石菖蒲水煎液組、石菖蒲揮發(fā)油組、β-細(xì)辛醚組與模型組比跨過原平臺(tái)位置次數(shù)顯

5、著增多(P<0.01)。
　　3.模型組海馬組織Ach和ChAT與正常組相比均顯著減少(P<0.01)， AchE活性則明顯升高(P<0.01)。與模型組比，各治療組 Ach和 ChAT結(jié)果顯著升高，均有顯著性差異(P<0.01)，與多奈哌齊組比較，石菖蒲水煎液組 Ach和 ChAT活性有顯著差異(P<0.05)。與模型組比，各治療組AchE含量顯著降低，均有顯著性差異(P<0.01)，與多奈哌齊組比較，石菖蒲水煎液組和β-細(xì)辛醚

6、組 AchE活性有顯著差異(P>0.05， P<0.01)。
　　4.海馬組織 NGF含量結(jié)果表明，模型組 NGF含量明顯降低(P<0.01)。各治療組 NGF含量結(jié)果顯著升高，均有顯著性差異(P<0.01)。與多奈哌齊組比較，石菖蒲水煎液組、石菖蒲揮發(fā)油組和β-細(xì)辛醚組NGF含量有顯著差異(P<0.05，P<0.01)。
　　5.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，模型組神經(jīng)細(xì)胞G1峰左側(cè)出現(xiàn)亞二倍體細(xì)胞群的峰型。

7、各治療組亞2倍體峰均有一定程度上出現(xiàn)。模型組海馬組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡率與正常組相比均顯著增高(P<0.01)。與模型組比，各治療組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率顯著降低，均有顯著性差異(P<0.01)，與多奈哌齊組比較，石菖蒲水煎液組、石菖蒲揮發(fā)油組和β-細(xì)辛醚組神經(jīng)細(xì)胞凋亡率有顯著差異(P<0.05，P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1.痰濁困阻，蒙蔽腦竅為老年性癡呆發(fā)病的重要因素，化痰開竅醒神益智是癡呆治療的重要法則。
　　2.無論從

8、反映空間學(xué)習(xí)記憶獲取能力的定位航行試驗(yàn)，還是從反映信息貯存能力的空間搜索實(shí)驗(yàn)來看，治療各組能有效地改善實(shí)驗(yàn)大鼠的學(xué)習(xí)行為能力。其中石菖蒲揮發(fā)油組效果最好，其次順序依次為多奈哌齊組、β-細(xì)辛醚組、石菖蒲水煎液組。
　　3.石菖蒲及提取物對(duì)中樞膽堿能損害具有修復(fù)作用，能增加海馬組織內(nèi)源性 NGF含量，抑制腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡，其中均以石菖蒲揮發(fā)油組效果最佳。
　　4.石菖蒲及其提取物能有效改善模型大鼠受損的學(xué)習(xí)記憶水平，其作用機(jī)制可能