調(diào)節(jié)性B細(xì)胞與抗體誘導(dǎo)的移植耐受的相關(guān)性研究.pdf

1、調(diào)節(jié)性免疫細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)是目前移植免疫領(lǐng)域研究熱點(diǎn)內(nèi)容之一,其中調(diào)節(jié)性B細(xì)胞（Regulatory B cells，Bregs）是新近發(fā)現(xiàn)的一群具有負(fù)向調(diào)節(jié)功能的B細(xì)胞，該類細(xì)胞可通過(guò)多種作用方式從而促進(jìn)器官移植術(shù)后免疫耐受形成，以及維持耐受狀態(tài)。Bregs的發(fā)現(xiàn)及作用機(jī)制的研究,為誘導(dǎo)移植耐受策略提供了新方向。但是目前對(duì)于Bregs細(xì)胞的表型、功能、及調(diào)節(jié)機(jī)制沒(méi)有深入的認(rèn)識(shí),尤其在移植免疫中Bregs細(xì)胞發(fā)揮的作用至今尚未明確。在已有報(bào)道的

2、基礎(chǔ)上，我們進(jìn)行了以下研究。
　　本研究立了同種異基因小鼠胰島移植動(dòng)物模型，按以下方式分組：對(duì)照組（n=5）；單純移植1周組（n=5）；移植+雙抗體1周組（n=5）；單純移植2周組（n=5）；移植+雙抗體2周組（n=5）；長(zhǎng)期耐受組（即移植物存活超過(guò)90天）（n=4）。流式細(xì)胞儀檢測(cè)移植后受體小鼠脾細(xì)胞中CD19+CD5+CD1d+B10細(xì)胞和CD19+Tim-1+B細(xì)胞比例。結(jié)果表示，只有移植+雙抗體2周組小鼠體內(nèi)的B10細(xì)胞有

3、明顯增加，最高增加至5.9％（P<0.05)。單純移植2周組、移植+雙抗體2周組，以及長(zhǎng)期耐受組小鼠體內(nèi)的CD19+Tim-1+B細(xì)胞則均有明顯增加（P<0.05)。為進(jìn)一步明確Bregs是通過(guò)與哪些免疫細(xì)胞作用而促進(jìn)耐受形成，同期檢測(cè)了CD4+CD25+Tregs以及CD4+IFN-γ+Th1細(xì)胞和CD4+IL-4+Th2細(xì)胞。結(jié)果表明，移植+雙抗體2周組小鼠體內(nèi)的CD4+CD25+Tregs和CD4+IL-4+Th2均有顯著增加（P

4、<0.05)，CD4+IFN-γ+Th1細(xì)胞則明顯減少（P<0.05)。并且，除Th2細(xì)胞外，長(zhǎng)期耐受小鼠的各淋巴細(xì)胞比例變化趨勢(shì)都與術(shù)后2周數(shù)據(jù)一致。以上結(jié)果提示在抗CD45RB/抗Tim-1聯(lián)合誘導(dǎo)的小鼠移植耐受過(guò)程中，調(diào)節(jié)性B細(xì)胞在耐受的初期及維持過(guò)程中都起到了重要作用，其具體機(jī)制可能是通過(guò)與調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，Th1細(xì)胞以及Th2細(xì)胞的相互作用參與免疫調(diào)節(jié)。對(duì)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的擴(kuò)增條件進(jìn)行了探索。結(jié)果表明LPS可刺激B10細(xì)胞在體外進(jìn)行增