款冬花中萜類和黃酮類化合物分離技術(shù)研究.pdf

1、款冬花作為重要的中藥材，具有潤肺止咳、化痰平喘等功效，在《本草綱目》、《中國藥典》中均有收錄。以款冬花為原料的中成藥已有1000多種（規(guī)格），如寒喘丸、止咳平喘片等。植物化學(xué)研究發(fā)現(xiàn)：其有效成分為萜類組分及黃酮類組分等。其中，款冬酮具有升壓作用，款冬花素和款冬花素內(nèi)酯具有抑制血小板的聚集作用、而款冬花黃酮類組分具有顯著的抗衰老作用。廣泛用于祛咳平喘類中成藥和保健品中。本文建立了基于高速逆流色譜技術(shù)和查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附技術(shù)的分離純

2、化款冬花有效成分的方法。
　　采用離線二維高速逆流色譜技術(shù)分離純化款冬酮等萜類有效成分。采用HPLC技術(shù)測(cè)定款冬花石油醚萃取部分主要組分在不同溶劑體系中的濃度，計(jì)算分配系數(shù)。實(shí)驗(yàn)在正己烷-正丁醇-乙腈（V/V=10:3:6），溫度25℃，轉(zhuǎn)速為850rpm/min，流速1.5mL/min下，采取正向洗脫，擠壓洗脫等方式，進(jìn)行一維HSCCC分離，隨后在正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（V/V=8:1:6:3）溫度25℃，轉(zhuǎn)速1000rpm

3、/min，流速1.0mL/min下進(jìn)行離線二維HSCCC分離，可定向獲得指標(biāo)性組分款冬酮。同時(shí)，也獲得14-去乙酰基-3,14-去氫-1α-(2-甲基丁酸)款冬花素內(nèi)酯和2,2-二甲基-6-乙?；讲⒍溥拎?，純度均達(dá)到了90％以上。由此，建立了基于高速逆流色譜技術(shù)對(duì)款冬酮的定向、高效地純化方法。
　　利用殼聚糖和硅膠各自的優(yōu)勢(shì)，制備了對(duì)黃酮類化合物具有良好選擇性的查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附材料。以槲皮素為吸附過程的研究對(duì)象，通

4、過等溫吸附實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)查耳酮接枝殼聚糖/硅膠對(duì)槲皮素的吸附過程為吸熱過程，擬合Langmiur吸附等溫模型，其相關(guān)系數(shù)達(dá)到0.995、查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附槲皮素表現(xiàn)為單層吸附。研究了吸附時(shí)間對(duì)查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附槲皮素的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，二級(jí)吸附動(dòng)力學(xué)方程能更好的描述槲皮素在查耳酮接枝殼聚糖上的吸附行為，查耳酮接枝殼聚糖/硅膠吸附槲皮素的吸附過程可能受多個(gè)步驟共同控制；在蘆丁和槲皮素競爭吸附研究發(fā)現(xiàn)，查耳酮接枝殼聚糖/硅膠對(duì)

5、槲皮素具有較高的選擇性，選擇性系數(shù)達(dá)到了4.85。對(duì)比了查耳酮接枝殼聚糖/硅膠、殼聚糖/硅膠和硅膠吸附槲皮素的能力，結(jié)果顯示：查耳酮接枝殼聚糖/硅膠對(duì)槲皮素的吸附量達(dá)到了17.49mg/g，為殼聚糖/硅膠和硅膠吸附量3.84mg/g和1.59mg/g的4.6倍和11.2倍。將制備的查耳酮接枝殼聚糖/硅膠應(yīng)用于款冬花黃酮類化合物的分離純化，在上樣液濃度為5mg/mL，pH值為4，流速為1BV/h的優(yōu)化條件下，進(jìn)行上樣吸附；在70%EtOH