STAT3反饋激活介導(dǎo)胃癌細(xì)胞對PI3K-AKT-MTOR抑制劑的耐藥性研究.pdf

1、胃癌是全球發(fā)病率第四位，死亡率第二位的常見惡性腫瘤。我國每年有40多萬例新發(fā)病例，約占世界新發(fā)病例數(shù)42％，每年約35萬人死于胃癌，在我國城市地區(qū)，該病是導(dǎo)致病人死亡的第二位原因。PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路在腫瘤細(xì)胞中被異常激活，因此一系列針對該信號(hào)通路分子的抑制劑被開發(fā)并進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)。靶向治療藥物的出現(xiàn)大大促進(jìn)了胃癌治療的進(jìn)展，但是腫瘤細(xì)胞不可避免地產(chǎn)生耐藥性限制了針對該信號(hào)通路抑制劑的治療效果，且分子機(jī)制也不清楚。STAT3

2、反饋激活在腫瘤細(xì)胞對廣泛的腫瘤靶向治療藥物產(chǎn)生耐藥性過程中發(fā)揮主導(dǎo)作用。因此研究針對這兩種靶點(diǎn)聯(lián)合用藥的策略，對于改善胃癌靶向性治療療效具有重要的意義。
　　目的：分析和揭示STAT3激酶反饋激活是PTEN缺失的胃癌細(xì)胞對PI3K/AKT/mTOR抑制劑產(chǎn)生耐藥性的重要因素;闡明STAT3激酶反饋激活的分子機(jī)制;探索以STAT3激酶和PI3K/AKT/mTOR為胃癌治療靶點(diǎn)，聯(lián)合用藥的策略以及對胃癌細(xì)胞的協(xié)同抑制功能。
　　

3、方法：利用PI3K/AKT/mTOR抑制劑(LY294002、BEZ235、MK2206、RAD001)單一或聯(lián)合STAT3激酶抑制劑（STATTIC）處理一系列胃癌細(xì)胞系，利用Western-blot檢測AKT激酶和STAT3激酶的表達(dá)及磷酸化水平;應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)等觀察單一或聯(lián)合用藥后對細(xì)胞周期、凋亡等細(xì)胞現(xiàn)象的影響;通過siRNA建立了HGC27敲低STAT3表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞系，并建立相應(yīng)的荷瘤小鼠模型，然后通過CCK8實(shí)驗(yàn)、平板克

4、隆實(shí)驗(yàn)等檢測細(xì)胞生長;利用荷瘤小鼠模型，檢測STAT3表達(dá)前后以及BEZ235處理后胃癌細(xì)胞生長速度。
　　結(jié)果：(1)在PTEN陰性的胃癌細(xì)胞中，PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路抑制劑反繢激活STAT3激酶活性;(2)抑制STAT3激酶活性能夠增加胃癌細(xì)胞對PI3K/AKT/mTOR抑制劑的敏感性;(3)抑制PI3K/AKT/mTOR激酶和STAT3激酶活性協(xié)同抑制胃癌細(xì)胞生長;(4)SDF-1/CXCR4軸參與了STAT3反