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1、目的:近年來(lái)霧霾天氣愈漸突出,石英和納米二氧化硅是霧霾天氣中大氣顆粒物的兩種主要富硅細(xì)顆粒礦物粉塵。本文以這兩種粉塵為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,研究及分析兩者對(duì)人肺腺癌 A549細(xì)胞的毒性作用。
方法:(1)50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL和800μg/mL的石英和納米二氧化硅兩種粉塵懸液,分別染毒A549細(xì)胞24 h,采用MTT試驗(yàn)分析這兩種粉塵對(duì)A549細(xì)胞存活率的影響。(2)50μg/mL、200μg
2、/mL和800μg/mL的石英和納米二氧化硅兩種粉塵懸液,分別染毒 A549細(xì)胞24 h,檢測(cè)培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力,分析不同濃度的這兩種粉塵對(duì) A549細(xì)胞膜通透性的影響差異;200μg/mL的石英和納米二氧化硅兩種礦物粉塵懸液,分別染毒A549細(xì)胞3 h、6 h和18 h,檢測(cè)培養(yǎng)上清液中LDH活力,分析這兩種粉塵對(duì)A549細(xì)胞膜通透性的影響隨染毒時(shí)間的變化趨勢(shì)。(3)50μ
3、g/mL、200μg/mL和800μg/mL的石英和納米二氧化硅兩種礦物粉塵懸液,分別于染毒A549細(xì)胞2 h、4 h、8 h、16 h、24 h和48 h,檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和谷胱甘肽酶(glutathione,GSH)含量。(4)流式細(xì)胞儀PI染色分析這兩種富硅細(xì)顆粒礦物粉塵對(duì)A549細(xì)胞周期及凋亡的影響。
結(jié)果:(1)在實(shí)驗(yàn)設(shè)定的50μg/mL-800μg/m
4、L濃度范圍內(nèi),與陰性對(duì)照組相比較,隨著兩種礦物粉塵懸液濃度的增高,A549細(xì)胞存活率降低,呈現(xiàn)較好的劑量-效應(yīng)關(guān)系。納米二氧化硅引起細(xì)胞的存活率降低程度大于石英。(2)兩種礦物粉塵染毒A549細(xì)胞24 h,細(xì)胞上清液中LDH的活力均增加,并隨礦物粉塵懸液濃度的增加,LDH的活力呈現(xiàn)增加的趨勢(shì);隨著兩種礦物粉塵懸液染毒時(shí)間延長(zhǎng),LDH的活力呈現(xiàn)增加的趨勢(shì);納米二氧化硅引起A549細(xì)胞的LDH釋放量大于石英。(3)在50μg/mL-800μ
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