菊花提取物抑制小鼠高脂性脂肪肝形成及其機制研究.pdf

1、目的:研究菊花提取物對小鼠高脂性脂肪肝形成的抑制作用及其可能機制。
　　方法:體內(nèi)實驗采用雄性小鼠,將小鼠隨機分為正常對照組、模型組、菊花提取物75、150、300mg/kg組及力平之40mg/kg組。小鼠在以高脂乳劑復(fù)制高脂性脂肪肝模型的同時,給予相應(yīng)的藥物6周后,取肝臟和血液,用比色法測定肝和血中的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和游離脂肪酸(FFA),以及肝中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;用光鏡觀察肝臟

2、的脂肪變性程度;用RT-PCR和Western blot方法,檢測肝組織中過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)α、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)-1c、脂肪酸合酶(FAS)、二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)、脂蛋白脂酶(LPL)和膽固醇7α羥化酶(CYP7A1)mRNA和蛋白表達的情況。體外實驗用BRL大鼠肝細胞株,采用含藥血清方法觀測菊花提取物對培養(yǎng)細胞內(nèi)TC、TG和FFA含量以及PPARα、SREBP-1c、FAS、LPL和C

3、YP7A1蛋白表達的影響。為了進一步明確菊花提取物的調(diào)脂作用是否與PPARα介導(dǎo)有關(guān),先以PPARα抑制劑(1μmol/LMK886)預(yù)處理BRL肝細胞2 h后,觀察對SREBP-1c、FAS和LPL蛋白表達的影響。
　　結(jié)果:在給予菊花提取物75-300mg/kg6周后,肝組織中的TC、TG、MDA含量和肝重系數(shù)降低(P<0.05或P<0.01),血中的TC和TG也有一定的降低,而肝中的SOD升高(P<0.01),但肝組織中的F

4、FA含量未見有明顯變化。菊花提取物可使小鼠肝組織脂肪變性的程度明顯減輕。RT-PCR和Western blot檢測結(jié)果顯示,菊花提取物可下調(diào)肝中的SREBP-1c和FAS表達,上調(diào)LPL、CYP7A1和PPARα的表達(P<0.05或P<0.01),但DGAT的表達未見明顯變化。在體外培養(yǎng)的BRL肝細胞上,菊花提取物含藥血清也可劑量依賴地降低細胞內(nèi)TC、TG和FFA的含量,下調(diào)SREBP-1c和FAS的蛋白表達,上調(diào)LPL和PPARα的