表面等離子共振技術(shù)和熒光光譜法研究生物分子相互作用.pdf

1、第一章綜述了表面等離子共振(SPR)技術(shù)的原理、特點(diǎn)、研究內(nèi)容及應(yīng)用，并詳細(xì)介紹了瑞典的BIAcore X型SPR生物傳感器組成及特點(diǎn)。簡單概述了熒光光譜法及其在藥物與生物大分子相互作用中的研究內(nèi)容。在此基礎(chǔ)上，提出了自己的研究內(nèi)容。
　　第二章運(yùn)用SPR技術(shù)研究了人免疫球蛋白G（人IgG）與其抗體的特異性結(jié)合作用?？疾炝税╬H值、離子強(qiáng)度、蛋白質(zhì)濃度等影響人IgG在傳感芯片表面的預(yù)結(jié)合的影響因素。選取最優(yōu)條件將其固定在芯片表面

2、，抗體流過后與固定物特異性結(jié)合，考察了芯片表面的再生條件。根據(jù)傳感圖譜，運(yùn)用軟件分析得到結(jié)合動力學(xué)常數(shù)Ka=9.37×104L·mol-1·s-1，解離常數(shù)Kd=3.83×10-3s-1。親和力常數(shù)KD=4.09×10-8mol·L-1。
　　第三章運(yùn)用表面等離子共振技術(shù)，采用競爭抑制分析法，研究了氯霉素與其抗體的相互作用。通過將小分子氯霉素與牛血清白蛋白的偶聯(lián)物固定在芯片上，將抗體與氯霉素作為分析物流過芯片表面，實時檢測相互作用

3、過程。氯霉素的檢測范圍為0～20ng/mL內(nèi)構(gòu)建了標(biāo)準(zhǔn)曲線。
　　第四章利用熒光光譜法研究了VB12與牛血清蛋白(BSA)的相互作用。得出VB12對BSA的猝滅為靜態(tài)猝滅機(jī)制。計算得出二者結(jié)合常數(shù)KA=1.00×105L/mol，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n=1.07。根據(jù)非輻射的能量轉(zhuǎn)移理論計算得出VB12與BSA的結(jié)合位置距離212位的色氨酸殘基為6.29nm。同時用同步熒光光譜法探討了VB12對酪氨酸和色氨酸殘基的影響。
　　第五章通