茶多酚的分離提取實(shí)驗(yàn)改進(jìn)及結(jié)果分析

1、茶多酚的分離提取實(shí)驗(yàn)改進(jìn)及結(jié)果分析馮愉慷 盧羽茜 康綺云摘要：重點(diǎn)介紹了以綠茶為原料提取茶多酚的實(shí)驗(yàn)室制法。該實(shí)驗(yàn)室制法在原有的金屬離子沉淀法，有機(jī)溶劑直接萃取法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，使之成為一個(gè)適合實(shí)驗(yàn)教學(xué)的實(shí)驗(yàn)．關(guān)鍵詞：茶多酚；提浸；實(shí)驗(yàn)室制法；茶多酚(Tea Polyphenols，TP） ，是從天然植物茶葉中分離提純的多酚類(lèi)化合物的復(fù)合體，約占茶葉干重的 25。其中兒茶素類(lèi)在茶多酚中占比倒最大，約 80% ，且抗癌防癌活性最強(qiáng)。兒茶

2、素屬黃烷醇類(lèi)，據(jù)報(bào)道：其抗癌活性按如下次序遞減；(一)表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)>(一)表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG)>(一)表沒(méi)食子兒茶索(EGC)>(一)表兒茶索(EC)。各種兒茶索在茶多酚中所占的比倒分別為(%)[1]：EGCG 50~60，ECG 15～2O，EGClO～15，EC 4～6；它們的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖 1。茶多酚的提取工藝目前已有了相當(dāng)?shù)难芯浚渲腥軇┙?、金屬離子沉淀是研究和報(bào)道較多的提取法，近幾

3、年來(lái)還出現(xiàn)了一些新的方法如樹(shù)脂吸附法、超臨界流體萃取法、超聲波浸提法及微波浸提法等。1.傳統(tǒng)方法回顧1.1 金屬離子沉淀法金屬離子沉淀法是利用茶多酚能與某些金屬離子絡(luò)合成結(jié)晶性沉淀物的特點(diǎn)，使其從浸提液中分離出來(lái)，實(shí)現(xiàn)與其它雜質(zhì)的初步分離。到目前為止，已有 Ca2+、Mg2+ 、Ba2+ 、Fe2+、Zn2+、Al3+ 等多種離子用于沉淀提取茶多酚的工藝報(bào)道[2.6]，這種提取過(guò)程的工藝流程如圖 2 所示。從流程可見(jiàn)，茶葉經(jīng)熱水浸提后，

4、加入沉淀劑即可得茶多酚與金屬離子的結(jié)晶性沉淀物，不必濃縮浸提液，可在一定程度上降低能耗，同時(shí)由于這些沉淀的選擇性較高，產(chǎn)品的純度相對(duì)較好，但在其后的稀酸轉(zhuǎn)溶過(guò)程中茶多酚損失較大，而且沉淀劑有的是有一定毒性的金屬離子，有的偏堿性易造成茶多酚的氧化。因此在產(chǎn)品的純度、收率、成本及安全性上仍不是完全令人滿(mǎn)意。3.實(shí)驗(yàn)具體方法1.材料：1.1 實(shí)驗(yàn)材料：茶葉，NaHSO3，乙醇,AlCl3·6H2O 或 ZnSO4·7H2O

5、,1mol/L 的 NaHCO3,1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備：索氏提取器，實(shí)驗(yàn)室蒸餾裝置,蒸發(fā)皿,過(guò)濾裝置.離心機(jī)、pH 試紙、2.實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)方法1. 將 10g 茶葉粉碎，放入折好的濾紙筒內(nèi)，向索氏提取器加入乙醇溶液至發(fā)生虹吸 茶葉粉碎，放入折好的濾紙筒內(nèi)，向索氏提取器加入乙醇溶液至發(fā)生虹吸.2.加入 加入 100mL 75%（沒(méi)有 （沒(méi)有 75%的話(huà)， 的話(huà)，70%也行）乙醇溶液、 也行）乙醇溶液、NaHSO3，0.4g，78.4℃條件

6、℃條件下回流 下回流 1 小時(shí) 小時(shí) 20 分(易溶于溫水 易溶于溫水(40℃一 80℃)和含水 和含水乙醇 乙醇中；穩(wěn)定性極強(qiáng)，在 中；穩(wěn)定性極強(qiáng)，在 pH 值 4—8、25℃左右的 左右的環(huán)境 環(huán)境中， 中，1.5 個(gè)小時(shí)內(nèi)均能保持 個(gè)小時(shí)內(nèi)均能保持穩(wěn)定 穩(wěn)定 )。3．鹽析 鹽析 :加氯化鈉于茶葉浸提液中，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 加氯化鈉于茶葉浸提液中，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 2-6 2-6％，靜置 ％，靜置 0.5-1.5h 0.5-1.5h 后過(guò)濾（

7、可用抽濾 后過(guò)濾（可用抽濾或者離心的方式） 或者離心的方式） 。4.將流出液轉(zhuǎn)移到蒸餾裝置 將流出液轉(zhuǎn)移到蒸餾裝置,蒸發(fā)濃縮 蒸發(fā)濃縮,移取濃縮后的茶多酚提取液 移取濃縮后的茶多酚提取液 10 mL 于小燒杯中 于小燒杯中,并加 并加入 20ml 去離子水，向?yàn)V液中加入 去離子水，向?yàn)V液中加入 AlCl3·6H2O 1.2g(15%-25%的硫酸鋁飽和溶液), 用 1mol/L 的 NaHCO3 約 10mL 調(diào)節(jié) 調(diào)節(jié) pH

8、 至 5.0-6.0，靜置 ，靜置 10min。 取上清液 取上清液 2-3mL，加 ，加 1滴 NaHCO3 后無(wú)渾濁，說(shuō)明沉淀完全。 后無(wú)渾濁，說(shuō)明沉淀完全。4.離心。取沉淀，用 離心。取沉淀，用 2mL 4-6mol 的鹽酸溶解（ 的鹽酸溶解（將沉淀在快速攪拌下放入到茶葉重量 將沉淀在快速攪拌下放入到茶葉重量 1-3 1-3 倍的 pH=2.5-4.5 pH=2.5-4.5 的鹽酸水溶液溶解沉淀，控制酸轉(zhuǎn)溶液的 的鹽酸水溶液溶解沉

9、淀，控制酸轉(zhuǎn)溶液的 pH=2.5-4.5 pH=2.5-4.5，酸轉(zhuǎn)時(shí)間 ，酸轉(zhuǎn)時(shí)間 10min- 10min-50min, 50min,少量膠狀沉淀經(jīng)離心分離出去。 少量膠狀沉淀經(jīng)離心分離出去。 ） ，過(guò)濾。加 ，過(guò)濾。加 2~4ml 乙酸乙酯萃取 乙酸乙酯萃取 4`5 次(2~10min)，合并濾液（取乙酸乙酯層） 合并濾液（取乙酸乙酯層） 。 ．合并提取液加入圓底燒瓶。 ．合并提取液加入圓底燒瓶。5.將洗滌后的乙酸乙酯相在 將洗滌