rt-pcr引物設計原則_第1頁
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文檔簡介

1、RT-PCR 引物設計原則引物長度: 17-25bpGC 含量： 45-55%Tm： 上下游引物 Tm 值相差不能太大Oligo：63-68℃ Primer3:60-65℃序列： 堿基要隨機分布，盡量均勻避免出現(xiàn) GC 或 AT 富含區(qū)（尤其 3' 端）避免出現(xiàn)多聚嘧啶、多聚嘌呤3' 端： 避免出現(xiàn) GC 或 AT 富含區(qū)3' 端堿

2、基最好是 G 或 C 最好不是 T互補： 引物自身、引物之間不要出現(xiàn) 3 個或更多堿基的互補3' 端不要出現(xiàn) 2 個或更多堿基的互補擴增產物大?。?0-150bpRT-PCR 引物設計原則引物長度: 17-25bpGC 含量： 45-55%Tm： 上下游引物 Tm 值相差不能太大Oligo：63-68℃ Primer3:60-65℃序列： 堿基要

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