濟(jì)南地區(qū)不同水體中環(huán)境激素含量測(cè)定及生物學(xué)效應(yīng)研究.pdf

1、環(huán)境激素類物質(zhì)廣泛存在于我們生存的環(huán)境中，對(duì)人類和其他生物的生存造成嚴(yán)重威脅。本研究首先采用重組基因酵母的方法初步檢測(cè)濟(jì)南地區(qū)不同水體(包括污水(污水處理廠進(jìn)水，厭氧池，生物反應(yīng)池，1A級(jí)出水，2級(jí)出水)；醫(yī)院出水(省中醫(yī)，婦幼保健院)；其他水樣(黃岡上，黃岡下，玉清湖，東平干渠，睦里莊，彭莊))中雌激素總體含量。由于重組基因酵母的方法靈敏性不高，重復(fù)性不好，進(jìn)而采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS)的方法測(cè)定這些水體中5種代表性

2、雌激素的含量(雌酮(E1)，雌二醇(E2)，雌三醇(E3)，乙炔基雌二醇(EE2)，己烯雌酚(DES))。通過之前雌激素含量測(cè)定的結(jié)果得知污水處理廠所采水樣中仍殘留較高濃度的環(huán)境激素，進(jìn)而選用斑馬魚作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行生物學(xué)效應(yīng)研究，采用real-time PCR的方法研究不同濃度雌酮及污水對(duì)成年雄性斑馬魚內(nèi)分泌相關(guān)基因表達(dá)變化情況的影響(vtg，esr)。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　首先采用重組基因酵母法檢測(cè)所采全部水樣中雌激素總體含量

3、。在所有水樣中，能檢測(cè)到雌激素活性的有婦幼保健院和省中醫(yī)出水，河流湖泊及排污口上下游水樣均未檢測(cè)出雌激素活性，而污水處理廠水樣中厭氧池，生物反應(yīng)池，1A級(jí)出水，2級(jí)出水未檢出，但污水處理廠進(jìn)水水樣中毒性太高，導(dǎo)致酵母死亡，無(wú)法測(cè)定其雌激素含量。
　　由于重組基因酵母法靈敏度低，重復(fù)性差，進(jìn)而采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法(HPLC-MS法)檢測(cè)水體中5種雌激素含量(雌酮(E1)，雌二醇(E2)，雌三醇(E3)，乙炔基雌二醇(EE

4、2)，己烯雌酚(DES))，污水處理廠按處理流程各級(jí)水樣中5種雌激素含量基本不發(fā)生變化，雌酮含量較高(約10ng/L)。醫(yī)院出水(婦幼保健院，省中醫(yī))中各種雌激素含量也很高(尤其是雌二醇，雌酮，己烯雌酚)，遠(yuǎn)高于其他河流及污水處理廠水樣。污水處理廠排污口上游和下游中雌激素殘留也較高(雌酮含量約10ng/L)。
　　在檢測(cè)了所采水樣中雌激素含量之后，初步明確環(huán)境水樣中雌激素污染程度，在此基礎(chǔ)上進(jìn)而研究其生物學(xué)效應(yīng)，從而探討環(huán)境雌激素

5、對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物乃至對(duì)人類可能造成的危害。雌酮作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，首先研究成年雄性斑馬魚在雌酮中的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)，采用real-time PCR的方法研究雌酮對(duì)斑馬魚肝臟中vtg及esr基因表達(dá)變化情況的影響。然后將成年雄性斑馬魚分別在污水處理廠進(jìn)水，2級(jí)出水，1A級(jí)出水水樣中暴露15天進(jìn)行real-time PCR研究污水對(duì)斑馬魚肝臟中vtg及esr基因表達(dá)變化情況的影響。污水處理廠所取水樣均能使雄魚vtg表達(dá)水平升高，而且都是5天時(shí)達(dá)到最高，然