《微生物和微生物學(xué)檢驗》

1、《微生物和微生物學(xué)檢驗》,xxx,緒論,,一、微生物（microorganisms）：,概念：一群肉眼看不見的微小生物，包括：細菌、螺旋體、立克次體、衣原體、支原體、放線菌（原核）、病毒（非細胞）、真菌（真核）。原核與真核細胞的區(qū)別：細胞核的區(qū)別,最新生物進化分類法： 古細菌： (Archaeobacteria) 嵌合

2、進化或共生進化 真細菌： 　　 真核生物：,,,微生物與人類的關(guān)系：,（1）大多數(shù)不致病，甚至是對人、動、植物有益和必需的，如：固氮菌；釀酒、制醋、抗生素、腸道正常菌群。（2）病原微生物 : pathogenic microorganisms,二、微生物學(xué)(microbiology)：,微生物的進化分類、生命活動規(guī)律及與動植物、人類、自然相互關(guān)系。按研究對象分：細菌、病毒、真菌學(xué)按應(yīng)用領(lǐng)域

3、分：工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)按研究方向分：基礎(chǔ)微生物、分子微生物學(xué)、 微生態(tài)學(xué) 等,醫(yī)學(xué)微生物學(xué)(medical microbiology)：與醫(yī)學(xué)有關(guān)病原微生物的生物性狀、致病機理、免疫性及有關(guān)技術(shù)和理論的應(yīng)用。臨床微生物學(xué)(clinical microbiology)：測重研究感染性疾病診斷方法，提供診斷依據(jù)和指導(dǎo)用藥。,三、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)發(fā)展簡史,1、微生物學(xué)的經(jīng)驗時

4、期：（１）釀酒、制醋、腌臘等食品生產(chǎn)、保存；（２）師道南《天愚集》：清乾隆年間，“東死鼠，西死鼠，人見死鼠如見虎。鼠死未幾日，人死如圻堵”； “三人行未十步路，忽死兩人橫截路” （３）人痘接種法：免疫最早概念。,2．實驗微生物學(xué)時期（17世紀始）： 顯微鏡＋培養(yǎng)基（１） 微生物的發(fā)現(xiàn)：列文虎克、巴斯德（發(fā)現(xiàn)微生物的作用，創(chuàng)立巴氏消毒法）、李斯特、郭霍氏（固體培養(yǎng)、染色技術(shù)） 郭霍氏法則：①、②、③、

5、④?！≈饾u被淘汰。 新的病原確定方法：核酸確定法 （２） 免疫學(xué)的興起、分離：牛痘、巴斯德（霍亂、炭疽、狂犬疫苗）、白喉抗毒素動物血清治愈白喉。（３） 抗生素的發(fā)現(xiàn)：目前遇到的問題：濫用導(dǎo)致耐藥性增高,3． 現(xiàn)代微生物學(xué)時期：近二、三十年（1）新病原微生物的發(fā)現(xiàn)a．傳統(tǒng)病原卷土重來；b．新型病原。（2）致病機理的深入研究a．采用新技術(shù)；b. 各種致病因素的分子機理及調(diào)控。,（3）診斷技術(shù)的發(fā)展：三大標(biāo)

6、記技術(shù)各種分子生物學(xué)技術(shù)：核酸雜交，PCR，微量化，自動化。（4）各種新型疫苗的研制傳統(tǒng)疫苗、亞單位疫苗、基因工程疫苗、DNA疫苗。（5）免疫學(xué)獨立遠遠超越感染免疫的范疇。,思考：（１）預(yù)測微生物學(xué)發(fā)展下一階段；（２）目前科學(xué)界研究熱點？,4．基因組微生物學(xué)（１）微生物在基因組前時代在生物學(xué)研究中的地位； （２）結(jié)構(gòu)簡單，可做為模型，模式生物；（３）在基因組時代，作為急先鋒；（４）微生物基因組的

7、研究成功，必然極大地改變微生物學(xué)科現(xiàn)狀。因此，微生物學(xué)研究正面臨前所未有地機遇和挑戰(zhàn)。從上看出，醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的發(fā)展，也是各種技術(shù)方法的發(fā)展，也是臨床微生物學(xué)的發(fā)展歷史。,四、 臨床微生物學(xué)的任務(wù),１．研究感染性疾病的病原體特征： 傳統(tǒng)的病原微生物 條件致病菌２．提供快速、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷；３．指導(dǎo)合理使用抗生素；　　目前檢驗科的主要任務(wù)。４．對醫(yī)院感染進行監(jiān)控。,,五、臨微學(xué)習(xí)方法：,重要性：與畢

8、業(yè)后工作緊密相關(guān)。（１）平時注意預(yù)習(xí)、復(fù)習(xí)；（２）對內(nèi)容上，緊緊圍繞診斷，診斷又是由各種典型特性建立的方法來進行的 抓特性、去共性（３）注意新動向。,第一篇　　微生物學(xué) 細菌學(xué)總論,一、細菌(bacterium)的形態(tài)與結(jié)構(gòu),（一）形態(tài)：個體微小、形態(tài)各異球菌（coccus）桿菌 (Bacillus) 弧菌與彎曲菌

9、螺旋菌及螺旋體不規(guī)則形。,,（二）結(jié)構(gòu)：,,１．基本結(jié)構(gòu)：包括胞壁、胞膜、胞漿及核質(zhì)細胞壁： 主要成分――肽聚糖。,,Ｎ－乙酰胞壁酸 聚糖骨架 β－１.4糖苷鍵 Ｇ－ Ｎ－乙酰葡糖胺 四肽側(cè)鏈Ｇ＋

10、 五肽橋（苷氨酸）Ｇ＋菌肽聚糖厚、層數(shù)多、立體狀堅固。,,,,,,膜磷壁酸Ｇ＋菌細胞壁 壁磷壁酸 特殊結(jié)構(gòu) 表面蛋白：SPA、M蛋白Ｇ－菌細胞壁 磷脂特殊結(jié)構(gòu) 脂蛋白 類脂Ａ：毒性部分(外膜) 脂多糖（LP

11、S，內(nèi)毒素）： 核心多糖：屬和組特異 特異多糖：種和型特異,,,,,Ｇ＋和Ｇ－菌細胞壁差異：,,Ｌ型細菌：細胞壁缺陷型細菌。 高滲培養(yǎng)基中：油煎蛋樣菌落。 在臨床上注意Ｌ型帶來的漏

12、診。,2. 特殊結(jié)構(gòu)莢膜(capsule)：（１）保護作用；（２）致病作用：侵襲力；（３）免疫原性；（４）鑒別與分型。,鞭毛(flagellum)：運動器官，Ｈ抗原。,,菌毛(Pilus)：（１）普通菌毛：粘附素；（２）性菌毛：１－４根，長而粗，Ｆ＋菌轉(zhuǎn)移Ｆ質(zhì)粒，耐藥及毒力質(zhì)粒。,,芽胞(Spore)：不利環(huán)境中的一種抵抗形式，是休眠體而非繁殖體。,二、細菌的繁殖與新陳代謝：,掌握幾個概念：１．自養(yǎng)菌、異養(yǎng)菌；２．需氧菌、專性厭氧

13、菌、兼性厭氧菌、微需氧菌。,,專性厭氧菌有氧不生長，原因有二：①厭氧菌缺乏細胞色素與細胞色素氧化酶，因此不能氧化那些氧化還原電勢較高的氧化型物質(zhì)。②厭氧菌缺乏過氧化氫酶、過氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能清除有氧環(huán)境下所產(chǎn)生的超氧離子（O2-）和過氧化氫（H2O2），因而難以存活。,,３． 群體細菌的生長繁殖曲線：遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰退期,四、消毒與滅菌,掌握幾個概念： 消毒（Disinfection）：殺

14、滅病原微生物的方法。 滅菌（Sterilization）：殺滅物體上所有的微生物（包括病原體和非病原體的繁殖體和芽胞）的方法。 無菌（Asepsis）：物體上或容器內(nèi)無活菌存在的意思。 防腐（Antisepsis）：防止或抑制微生物生長繁殖的方法。,五、微生物的遺傳變異,（一）遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ) 染色體 質(zhì)粒（plasmid）：細菌存在于染色體外的少部分（約1～2%）DNA，可決定細菌的一些生物學(xué)特性。 轉(zhuǎn)

15、位因子：插入順序、轉(zhuǎn)座子 、轉(zhuǎn)座噬菌體,,質(zhì)粒的生物學(xué)性質(zhì)：1．質(zhì)粒并非細菌生存所必不可少的遺傳物質(zhì)。 2．質(zhì)粒的傳遞（轉(zhuǎn)移）是細菌遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的一個重要方式。 3．質(zhì)?？勺孕惺セ蚪?jīng)人工處理而消失。 4．質(zhì)?？梢元毩?fù)制。 5．可有幾種質(zhì)粒同時共存在于一個細菌內(nèi)。,,（二）細菌的變異現(xiàn)象 形態(tài)與結(jié)構(gòu)變異 培養(yǎng)特性變異 毒力變異 耐藥性變異,,（三）細菌變異的機制 突 變 基因的

16、轉(zhuǎn)移和重組轉(zhuǎn)化（transformation）是受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段，通過與染色體重組，獲得了供體菌的部分遺傳特性。轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)是噬菌體為媒介，把供細菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，導(dǎo)致后者基因改變的過程。接合(conjugation)是兩個通過直接接觸，在暫時的溝通中進行基因轉(zhuǎn)移的過程。,,,,(四)遺傳變異研究的實際意義在細菌分類上的應(yīng)用在診斷中的應(yīng)用在預(yù)防中的應(yīng)用在治療中的應(yīng)用檢查致癌物

17、質(zhì)的作用在遺傳工程方面的應(yīng)用,六、微生物的致病性與感染,（一）微生物與宿主的關(guān)系 常居菌 正常菌群 過路菌 （１）抵抗力下降； （２）長期化療、放 療、

18、 條件致病菌： 免疫抑制劑患者； （３）外傷； （４）菌群失調(diào)：菌群失調(diào)癥。,,,,正常菌群的生理意義：（１）生物拮抗；（２）促進機體免疫；（３）與衰老有關(guān)：雙歧桿菌；（４）合成維生素和細菌素。,（二）細菌的致病物質(zhì)及作用：

19、１．細菌的表面成分：參與粘附、定植和侵入；２．毒素及毒性蛋白和酶：外毒素：內(nèi)毒素：,細菌外毒素舉例,外毒素與內(nèi)毒素的主要區(qū)別,,醫(yī)院感染：醫(yī)院中發(fā)生的一切感染。包 括在醫(yī)院中活動的所有人群。 外源性感染 內(nèi)源