實(shí)驗(yàn)室生物安全綜述

1、實(shí)驗(yàn)室生物安全,,第一章 實(shí)驗(yàn)室生物安全概述,2,第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全的概念,3,一、生物危害 廣義的生物危害 是指各種生物因子對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)造成的危害或潛在 的危害。狹義的生物危害 是指在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行感染性致病因子的科學(xué)研究過程中對(duì) 實(shí)驗(yàn)室人員造成的危害和對(duì)環(huán)境的污染。,4,二、生物安全1.生物安全 是指防范、處理微生物及其毒素對(duì)人體危害的綜合措施。2.實(shí)驗(yàn)室生物安

2、全 是指以實(shí)驗(yàn)室為科研和工作場(chǎng)所時(shí)，避免危險(xiǎn)生物因子造 成實(shí)驗(yàn)室人員暴露、向?qū)嶒?yàn)室外擴(kuò)散并導(dǎo)致危害的綜合措 施。,5,三、生物安全的相關(guān)術(shù)語有害生物因子 是指那些能夠?qū)θ?、環(huán)境和社會(huì)造成危害作用的生物因子。2. 危害廢棄物 是指具有潛在生物危險(xiǎn)、可燃、易燃、腐蝕、有毒、放射 和起破壞作用的對(duì)人、環(huán)境有害的一切廢棄物。3. 氣溶膠 是指懸浮于氣體介質(zhì)中的固態(tài)或

3、液態(tài)微小粒子形成的相對(duì) 穩(wěn)定的分散體系（粒徑一般為0.001~10μm）。,6,4.緩沖間 是指設(shè)置在清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)相臨兩區(qū)之間 的緩沖密閉室，具有通風(fēng)系統(tǒng)，其兩個(gè)門具有互鎖功能， 且不能同時(shí)處于開啟狀態(tài)。 5.生物安全柜 生物安全實(shí)驗(yàn)室中極為重要的設(shè)備，其主要原理是使安 全柜內(nèi)保持負(fù)壓，氣流只能從外部進(jìn)入安全柜，使柜內(nèi) 的病原微生物不能溢出，從而保護(hù)工作人員，同時(shí)其

4、循 環(huán)風(fēng)和排風(fēng)經(jīng)過高效過濾器過濾，又能保護(hù)環(huán)境。,7,第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室感染的類型和來源,8,一、實(shí)驗(yàn)室感染的類型,1.氣溶膠導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室感染 由于實(shí)驗(yàn)室中的病原微生物可以以氣溶膠的形式飄浮在空 氣中，工作人員吸入了這種污染的空氣而造成感染。 2.事故性感染 因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室人員操作過程中的疏忽，使本來接觸不到的病 原微生物污染環(huán)境，直接或間接感染實(shí)驗(yàn)室人員甚至危及 周圍環(huán)境。 3.人為

5、破壞 有意播散生物制劑。,9,二、實(shí)驗(yàn)室感染的來源,（一）標(biāo)本 1.檢測(cè)標(biāo)本：實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本；臨床標(biāo)本。 2.菌毒種：一類；二類；三類；四類。（二）儀器設(shè)備使用過程中產(chǎn)生的污染 1．離心機(jī)：可能造成實(shí)驗(yàn)室感染的有氣溶膠、飛濺物和 離心管泄漏等。 2．組織勻漿器、粉碎器及研磨器： 可能造成實(shí)驗(yàn)室感染的有氣溶膠、漏和容器破碎等。

6、 3．超聲波器具：氣溶膠。,10,4．真空冷凍干燥機(jī)及離心濃縮機(jī)： 氣溶膠；直接接觸污染。5．培養(yǎng)攪拌器、振蕩器和混勻器： 氣溶膠；飛濺物；溢出物。6．恒溫水浴器和恒溫震蕩水浴器： 微生物生成；氣溶膠7．厭氧罐： 爆裂，散布傳染性物質(zhì)。,11,（三）操作過程產(chǎn)生的污染 1. 接種：氣溶膠。應(yīng)使用無彈力的鉑絲接種環(huán)，細(xì)菌接種 后接種環(huán)火

7、焰滅菌易崩散，酒精燈燒灼時(shí)要特別 注意。 2. 混勻：氣溶膠。吸管吸吹菌液時(shí)不要產(chǎn)生氣泡，應(yīng)沿容 器壁排出。 3. 研磨：氣溶膠。最好使用組織研磨器，乳缽易產(chǎn)生氣溶 膠。 4. 移液：吸管上端的棉花松緊要適度，吸液時(shí)要從管底吸 取，吹出時(shí)要輕緩

8、，不要全部吹凈，以免產(chǎn)生氣 泡，形成氣溶膠。,12,5. 開封：溢出， 要避免壓力和氣流的急劇變化。6. 離心：離心管套底墊要完好，使用匹配的管、套、 離心頭，加蓋。7. 注射：做好個(gè)人防護(hù)，正確使用注射器。8. 搬運(yùn)：室內(nèi)移動(dòng)要避免滑落，移出室外要有堅(jiān)實(shí) 密閉的外包裝。,13,第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù),14,一、

9、實(shí)驗(yàn)室防護(hù)器材 1. 一級(jí)屏障 是操作者和被操作對(duì)象之間的隔離，以防止操作人員被 感染為目的，也稱一級(jí)隔離 。 如：生物安全柜、防護(hù)服、手套、安全眼鏡、呼吸防護(hù) 裝置、緊急沖洗裝置等。 2.二級(jí)屏障 是生物安全實(shí)驗(yàn)室和外部環(huán)境的隔離，也稱二級(jí)隔離。 是一級(jí)屏障的外圍設(shè)施。以防止實(shí)驗(yàn)室以外的人員被感 染為目的。 如：實(shí)驗(yàn)室的建筑、結(jié)構(gòu)和裝修、電氣和自控

10、、通風(fēng)和 凈化、給水排水和氣體供應(yīng)、消防和滅菌等。,15,二、規(guī)范化實(shí)驗(yàn)室管理 1.實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)章制度：包括培訓(xùn)制度、準(zhǔn)入制度、健 康監(jiān)測(cè)報(bào)告制度、個(gè)人良好行為制度、意外事故報(bào)告 制度等。 2.標(biāo)準(zhǔn)操作程序：包括實(shí)驗(yàn)廢棄物處置標(biāo)準(zhǔn)操作程序、 進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)程序、菌毒種使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序、實(shí) 驗(yàn)室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序、 意外事故處理標(biāo)準(zhǔn)操作程 序及各種儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序等。,16,

11、第二章 實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,17,第一節(jié) 病原微生物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,18,一、病原微生物的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)第一類病原微生物能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。如: 鼠疫耶爾森菌、霍亂弧菌；天花病毒、新疆出血熱病毒、埃博拉病毒、猴痘病毒等29種病原體 。第二類病原微生物能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。如：炭疽

12、桿菌、布氏桿菌、結(jié)核分枝桿菌、艾滋病病毒、高致病性禽流感病毒、乙型腦炎病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、狂犬病毒、SARS冠狀病毒、西尼羅病毒等 70 種。,19,第三類病原微生物:能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。如: 沙眼衣原體、破傷風(fēng)梭菌 致病性大腸桿菌、腦膜炎球菌、傷寒沙門菌、志賀菌、葡萄球菌；鉤端螺旋體；白假

13、絲酵母菌、腸道病毒、輪狀病毒、肝炎病毒、風(fēng)疹病毒、流感病毒、皰疹病毒等275種。第四類病原微生物:在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。如: 小鼠白血病病毒；減毒、弱毒菌株，以及不屬于以上三類的各種低致病性微生物菌種。,20,第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,21,實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)從以下各方面進(jìn)行：1.所有儀器設(shè)備是否都經(jīng)過安全使用認(rèn)證。2.在對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行維護(hù)之前，是否進(jìn)行了清除污染工作。3.生物

14、安全柜和通風(fēng)櫥是否進(jìn)行定期檢測(cè)和保養(yǎng)。4.高壓滅菌器和其他壓力容器是否定期檢查。5.離心機(jī)的離心吊桶及轉(zhuǎn)子是否定期檢查。6.是否有盛放碎玻璃的安全容器。7.是否配備并使用供丟棄銳器的容器。8.是否配備并使用污染廢棄物專用容器。,22,第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)室生物安全的環(huán)境評(píng)估,23,實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境評(píng)估因素涉及： 1.實(shí)驗(yàn)室建筑 2.儲(chǔ)存設(shè)施 3.環(huán)境衛(wèi)生和工作人員設(shè)施 4.實(shí)驗(yàn)室生物安全保障 5.暖氣和通風(fēng) 6.照明,

15、24,實(shí)驗(yàn)室建筑總體是否整齊，并且周圍沒有障礙物實(shí)驗(yàn)室建筑是否清潔地板是否有任何結(jié)構(gòu)缺陷，是否防滑活動(dòng)空間和走廊是否滿足人員通行和大型儀器設(shè)備的搬運(yùn)試驗(yàn)臺(tái)表面是否耐溶劑和腐蝕性化學(xué)品的侵蝕是否每個(gè)實(shí)驗(yàn)室房間都有洗手池實(shí)驗(yàn)室建筑在結(jié)構(gòu)和維護(hù)中能否避免嚙齒類動(dòng)物和節(jié)肢動(dòng)物進(jìn)入及滯留所有暴露在外的蒸汽管道和熱水管道是否采取了隔熱或防護(hù)措施來保護(hù)人員安全是否配備有斷電時(shí)使用的獨(dú)立供電系統(tǒng),是否安排了儲(chǔ)存設(shè)備、儲(chǔ)存架來確保儲(chǔ)存物品

16、不會(huì)滑動(dòng)、倒塌或掉落儲(chǔ)存設(shè)施里是否堆積有易造成人員絆倒、火災(zāi)、爆炸和昆蟲匿藏的垃圾、閑雜材料和物品冰箱和儲(chǔ)存區(qū)域是否上鎖,建筑物是否處于清潔、有序和衛(wèi)生的狀態(tài)是否有飲用水是否提供冷熱水、肥皂和毛巾是否分別給男女工作人員提供了更衣間實(shí)驗(yàn)室的每一位成員是否都配備了存放日常服裝的設(shè)施是否有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行午餐等活動(dòng)的房間是否有適當(dāng)?shù)臋C(jī)構(gòu)來收集和處理普通生活垃圾噪聲水平是否在可接受范圍內(nèi),普通照明是否充分試驗(yàn)臺(tái)上是否有工作照明

17、日光燈色彩是否和諧,是否已經(jīng)進(jìn)行了定性的危險(xiǎn)度評(píng)估來明確規(guī)定安全保障系統(tǒng)所保護(hù)的范圍在不用時(shí)整個(gè)建筑物是否可以安全的鎖上門和窗是否是防破碎的裝有危害性物品以及貴重儀器設(shè)備的房間是否上鎖使用這樣的房間、儀器和物品是否進(jìn)行控制并需批準(zhǔn),工作溫度是否舒適對(duì)于直接暴露在陽(yáng)光下的窗戶是否裝有避光窗簾是否有足夠的通風(fēng)換氣通風(fēng)系統(tǒng)是否裝有高效空氣過濾器機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)是否會(huì)影響生物安全柜和通風(fēng)櫥內(nèi)部及周圍氣流,第三章 實(shí)驗(yàn)室生物安全

18、防護(hù)水平,25,一、實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平的分級(jí) 1.根據(jù)所操作的生物因子的危害程度和采取的防護(hù)措施， 將實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)水平分為4級(jí)，1級(jí)防護(hù)水平最低， 4級(jí)防護(hù)水平最高。 2.分別以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng) 生物安全防護(hù)水平。 3.一、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。 4.三、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，要 通過國(guó)家認(rèn)可，頒發(fā)相

19、應(yīng)級(jí)別的生物安全實(shí)驗(yàn)室證書， 證書有效期為5年。,26,二、BSL-1安全實(shí)驗(yàn)室 1.生物安全水平 能夠安全操作，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和動(dòng)物無明顯致病性的、對(duì)環(huán)境 危害程度微小的、特性清楚的病原微生物的生物安全水平。 2.用途 (1)生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)。 (2)從事具有明確生物學(xué)特征的、已知在健康成人中不引起疾病的微 生物菌株的研究。 3.安全裝備 (1)一般不需要生物安全柜。 (2)工作人員

20、在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿工作服。 (3)必要時(shí)戴手套或眼罩。 (4)配備常規(guī)的實(shí)驗(yàn)及清潔用具。,27,28,BSL-1安全實(shí)驗(yàn)室,三、BSL-2安全實(shí)驗(yàn)室 1.生物安全水平 能夠安全操作對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員和動(dòng)物致病性低的、對(duì)環(huán)境有輕微 危害的病原微生物的生物安全水平。 2.用途 從事與某些嚴(yán)重人類疾病有關(guān)的，但具有有效治療和預(yù)防措施的微 生物菌株研究。 3.安全裝備：（1）生物安全柜（II級(jí)）。（

21、2）實(shí)驗(yàn)外罩、手套等在離開時(shí)必須留在實(shí)驗(yàn)室中,不能污染非實(shí)驗(yàn)區(qū)。（3）在生物安全柜（II級(jí)）外操作感染性物質(zhì)，要使用個(gè)體防護(hù)裝備。（4）實(shí)驗(yàn)室提供帶鎖的門,以及相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)清潔設(shè)備。,29,30,BSL-2安全實(shí)驗(yàn)室,四、BSL-3安全實(shí)驗(yàn)室 1.生物安全水平 能夠安全地從事國(guó)內(nèi)和國(guó)外的、可能通過呼吸道感染、引起嚴(yán)重或致 死性疾病的病原微生物研究工作的生物安全水平。 2.用途 從事國(guó)內(nèi)和國(guó)外的、

22、可能通過呼吸道感染，引起嚴(yán)重或致死性疾病的 病原微生物的研究工作。 3.安全裝備 （1）生物安全柜（II級(jí)）。 （2）呼吸器、面罩和防護(hù)服。 （3）實(shí)驗(yàn)室由清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)組 成，污染區(qū)和半污染區(qū)之 間設(shè)緩沖間。必要時(shí)半污染區(qū)和清潔區(qū)之間亦設(shè)緩沖間。 （4）建造空氣管道通風(fēng)系統(tǒng)以進(jìn)行氣體消毒。,31,32,BSL-3安全實(shí)驗(yàn)室,五、BSL-4安全實(shí)驗(yàn)室 1、生物安全水平

23、 能夠安全地從事國(guó)內(nèi)和國(guó)外的、能通過氣溶膠傳播的、嚴(yán)重危害人和 動(dòng)物生命的、無特效治療和預(yù)防措施的微生物菌株研究工作的生物安 全水平。 2、用途 從事國(guó)內(nèi)和國(guó)外的、能通過氣溶膠傳播的、嚴(yán)重危害人和動(dòng)物生命的、 無特效治療和預(yù)防措施的微生物菌株研究工作。 3、安全裝備 （1）生物安全柜（III級(jí)）。 （2）防護(hù)服，呼吸器、正壓面