大學(xué)畜牧微生物學(xué)畜牧微生物病毒學(xué)各論

1、病毒學(xué)各論,微生物及免疫學(xué),雙股DNA病毒,單股DNA病毒,具有反轉(zhuǎn)錄過程的病毒,單負(fù)股病毒目,分節(jié)段的負(fù)股RNA病毒,套式病毒,其他正股病毒,朊病毒,雙股RNA病毒,病毒顆粒無囊膜，直徑27nm，20面體對稱外表光滑呈球形，由60多個亞單位組成，每個亞單位含有4種衣殼蛋白?；蚪M為單分子線狀正股RNA。,一、微RNA病毒科（Picornaviridae）,,口蹄疫是全球性最重要的動物疫病，常在牛群、豬群大范圍流行。多種偶蹄動物都易

2、感。感染率很高，致死率較低。人類偶能感染，表現(xiàn)發(fā)熱、食欲差及口、手、腳產(chǎn)生水泡。,口蹄疫病毒(FMDV),診斷 申報 被列為必須申報的疾病，診斷只能在指定的實驗室進(jìn)行。 檢測方法 OIE推薦使用商品化及標(biāo)準(zhǔn)化的ELISA試劑盒用于診斷，數(shù)小時出結(jié)果。也用細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒，分離的病毒通過ELISA或者中和試驗加以鑒定。,疫苗 弱毒疫苗可能散毒，不安全。推薦使用濃縮的滅活疫苗。,檢測豬血清中抗豬口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白

3、3ABC的抗體,腸道病毒EV71,手足口病(HFMD) 是由腸道病毒引起的傳染病，多發(fā)生于5歲以下的嬰幼兒，可引起發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹、潰瘍，個別患者可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等并發(fā)癥。引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種，其中柯薩奇病毒A16 型(Cox A16) 和腸道病毒71型（ EV 71）最常見。,二 分節(jié)段的負(fù)股RNA病毒,,分節(jié)段的RNA病毒有3個科即正粘病毒科、布尼病毒科和砂粒病毒科。正粘病毒科中禽流

4、感病毒在動物病毒中較為重要，核酸分8個節(jié)段，基因易發(fā)生基因重配，使病毒變異率較高，給預(yù)防帶來困難。流行的禽流感病毒毒株差異很大。布尼病毒中裂谷熱病毒是其中較為重要的病毒。,第一節(jié) 正黏病毒科（Orthomyxoviridae）病毒顆粒多形性，多球形；有囊膜及纖突，甲、乙型病毒纖突上有兩種糖蛋白（棒狀的凝血素蛋白H、蘑菇狀的神經(jīng)氨酸酶蛋白N）；基因組為8節(jié)段線狀負(fù)股單股RNA；細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制，胞漿膜出芽成熟釋放；對脂溶劑敏感，

5、在外環(huán)境中極不穩(wěn)定。,禽流感病毒(AIV)1.與人及哺乳動物流感有關(guān) 雖然早在1901年即分離禽流感病毒，但直到1955年才明確它與人及哺乳動物流感的關(guān)系。禽流感病毒某些毒株，可不經(jīng)過豬體混合重配而直接感染人。2.基因庫 水禽是流感病毒的“基因庫”，并對養(yǎng)禽業(yè)構(gòu)成潛在威脅。,禽流感電鏡照片,3.病毒毒力 禽流感的高致病力毒株(HPAlV)對雞有較強致病性，舊稱真性雞瘟。高致病性禽流感(HPAl)是OIE規(guī)定的A類疫病。病

6、毒毒力有很大差異。高致病力毒株主要有H7N7、H5N2、 H5N1亞型的某些毒株。,診斷 分離病毒非常必要，對鑒定病原及其毒力均不可少。病料 一般從泄殖腔內(nèi)采樣，也可采肝、脾、血液、肺等。分離 接種8-10日齡雞胚尿囊腔。鑒定 取尿囊液用雞紅細(xì)胞作HA-HI或ELISA等。進(jìn)一步鑒定亞型需送國家級指定實驗室完成。毒力分析 可將分離株接種雞，或用分離毒作空斑試驗，檢測其毒力，有毒株能產(chǎn)生空斑，無毒株則否。,高致病 OIE

7、規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)為：將含病毒的雞胚尿囊液原液用滅菌生理鹽水作1:10稀釋 靜脈內(nèi)接種4-8周齡SPF雞8只，每只0.2ml，隔離飼養(yǎng)觀察10d，死亡≥6只者，判為高致病性禽流感病毒。預(yù)防與控制 預(yù)防措施應(yīng)包括在國際、國內(nèi)及局部養(yǎng)禽場3個不同水平。 高致病力禽流感被OIE列為A類疫病，一旦發(fā)生應(yīng)立即通報。國內(nèi)措施主要為防止病毒傳人及蔓延。養(yǎng)禽場還應(yīng)側(cè)重防止由野禽傳給家禽，要有隔離設(shè)施阻擋野禽。一旦發(fā)生高致病力禽流感，應(yīng)采取斷然措施防

8、止擴散。滅活疫苗可作預(yù)防用。,三 彈狀病毒科（Rhabdoviridae）,,病毒顆粒子彈狀，直徑20nm長170nm。圓柱形核衣殼螺旋形對稱，有囊膜及膜粒?；蚪M為單分子負(fù)股單股RNA。,彈狀病毒結(jié)構(gòu)模式圖,彈狀病毒電鏡照片,狂犬病毒1.感染動物 病毒感染所有溫血動物，引致人與動物狂犬病，感染的動物和人一旦發(fā)病，兒乎都難免死亡。2.癥狀 狂犬病表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，有興奮型及麻痹型兩種。,透射電鏡下的狂犬病毒,3.致病機理 傳播

9、 主要傳播途徑為被帶毒動物咬傷，病犬唾液具有高度傳染性。病毒復(fù)制 病毒特異結(jié)合神經(jīng)肌肉結(jié)合處的乙酰膽堿受體及神經(jīng)節(jié)苷脂等受體。在傷口附近的肌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，而后侵入外周神經(jīng)系統(tǒng)，沿神經(jīng)軸索上行至中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在腦的邊緣系統(tǒng)大量復(fù)制，導(dǎo)致腦組織損傷，行為失控出現(xiàn)癥狀。病毒從腦沿傳出神經(jīng)擴散至唾液腺等器官，在其內(nèi)復(fù)制，并以很高的滴度分泌到唾液中。,4.診斷 具有確認(rèn)資格的人員才能作出狂犬病的實驗室診斷。往往要確定咬人的動物是否患狂犬病，

10、需作腦組織切片，檢測包涵體。 取其腦組織如小腦或海馬或唾液腺檢測，方法為熒光抗體染色。 RT-PCR技術(shù)檢測組織中的病毒RNA，敏感度高。5.預(yù)防與控制 應(yīng)及時撲滅狂犬病患畜。對家養(yǎng)犬、貓進(jìn)行弱毒疫苗免疫接種。,（1）形狀：20面體（2）核衣殼類型： 20面體（3）抵抗力：熱、光及脂溶劑敏感；耐干燥、不耐酸；（4）基因組：線狀雙股DNA，125Kb-235Kb。 （5）有囊膜，糖蛋白纖突,四 皰疹病毒科 (Herpesr

11、ividae),,一、主要特征,皰疹病毒構(gòu)造模擬圖,細(xì)胞介導(dǎo)的單純皰疹病毒內(nèi)吞作用,二、病毒的復(fù)制與感染,1、偽狂犬病病毒 豬為病毒原始宿主，成年豬多為隱性感染，懷孕母豬50％可發(fā)生流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎?；蚬こ桃呙缬糜陬A(yù)防。,三、主要的皰疹病毒,2、馬立克病病毒(MDV) 是雞的重要的傳染病病原，具有致腫瘤特性。可為神經(jīng)淋巴瘤病，出現(xiàn)麻痹等癥狀。疫苗預(yù)防。3、禽傳染性喉氣管炎病毒 各年齡段雞均易感，以4~

12、18周齡雞易感性高，表現(xiàn)為咳嗽、咳血。,三、主要的皰疹病毒,4、鴨瘟病毒 鴨等多種水禽均易感，有弱毒疫苗。,三、主要的皰疹病毒,主要特征：有囊膜，E2纖突重要，20面體對稱，基因組線性單股正鏈RNA，黃病毒屬以Vero細(xì)胞培養(yǎng)。瘟病毒屬以原動物細(xì)胞培養(yǎng)，多無CPE，抵抗力差。,五 黃病毒科,重要的動物病毒 （1）日本乙型腦炎病毒 人畜共患，多種動物感染，使幼駒表現(xiàn)神經(jīng)癥狀，孕豬繁殖障礙，以三喙庫蚊傳播，弱毒和滅

13、活苗預(yù)防 （2）牛病毒性腹瀉病毒 分CPE和非CPE兩型，可致犢牛、羊、鹿腹瀉。豬也可感染，牛黏膜病，引起綿羊抑制，經(jīng)胎盤傳播。,（3）豬瘟病毒 主要特征：感染豬有典型和非典型豬瘟，使孕豬繁殖障礙。 預(yù)防控制：ⅰ垃圾飼料注意消毒ⅱ撲殺有效，疫苗接種,六 痘病毒科（Poxviridae）,英國醫(yī)生Jenner(1798)開創(chuàng)用牛痘病毒預(yù)防人天花，是病毒免疫的里程碑。目前痘苗病毒被作為基因工程疫苗載體廣泛應(yīng)用，雞痘、綿羊

14、痘及羊口瘡為害較嚴(yán)重。,一、主要特征 （1）形狀：磚狀,,（2）核衣殼類型：復(fù)合對稱。 （3）抵抗力：熱差、冷強、耐干燥、不耐酸； （4）基因組：線狀雙股DNA，130Kb-375Kb （5）復(fù)制與釋放：胞漿內(nèi)復(fù)制，胞吐釋放。,二、傳播方式 傳播途徑：皮膚傷口感染、呼吸道、昆蟲叮咬感染。痘病毒感染宿主譜較窄。三、培養(yǎng)特點 痘病毒可在雞胚絨毛尿囊膜上生長，多數(shù)可在膜上形成痘斑。痘斑的形態(tài)等因痘病毒的種類而

15、異?？筛鶕?jù)痘斑特征，對病毒作出初步鑒定。,四、主要的痘病毒 1.痘苗病毒 痘苗病毒一直作為痘病毒的模型，同時廣泛用作疫苗預(yù)防天花。該病毒分布廣泛，而且宿主譜寬，在自然條件下能引致牛乳頭感染。,2.綿羊痘病毒 只感染綿羊，可致全身性皰疹，傷口、呼吸道感染。疫苗預(yù)防。,3.雞痘病毒 禽痘病毒屬的代表種為雞痘病毒。所有禽痘病毒均以吸血昆蟲為機械傳播媒介有皮膚型及黏膜型兩種形式，黏膜型雞痘又稱雞白喉，死亡率較高。,七 套式病毒目,,1

16、 冠狀病毒科,病毒顆粒為球形，直徑80-220nm，核衣殼螺旋對稱;有囊膜及長達(dá)20nm的棒狀纖突?；蚪M為單分子線狀正股單股RNA。,豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV),已報道4種冠狀病毒能感染豬：豬血凝性腦脊髓炎病毒豬流行性腹瀉病毒豬傳染性胃腸炎病毒豬呼吸道冠狀病毒(PRCV)。,致病 TGEV在世界各地均有發(fā)現(xiàn)，引致仔豬腹瀉，伴有嘔吐，3周齡以下的仔者有較高死亡率。但有時成年豬也有高死亡率，母豬表現(xiàn)為厭食、發(fā)熱、腹瀉及無

17、乳等。防制 仔豬可通過初乳及奶液獲得母源IgA抗體，產(chǎn)生被動免疫。,二、動脈炎病毒科 主要特征：20面體對稱，有囊膜，核酸為單股正鏈RNA復(fù)制和釋放方式與冠狀病毒相似 。,套式病毒目,,,,,,豬呼吸與繁殖綜合征病毒分為歐洲株和美洲株、我國美洲株。母豬感染流產(chǎn)，仔豬感染呼吸困難。病毒可能來源于小鼠乳酸脫氫酶病毒。病毒感染單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生免疫抑制。冬季流行。分離病毒可用肺巨噬細(xì)胞或MA-104/MAC-145

18、細(xì)胞?；蛉笔绾蜏缁蠲珙A(yù)防。,,（1）病毒無囊膜，球狀，直徑17-22nm；（2）基因組為單分子單股DNA，環(huán)狀，在細(xì)胞核復(fù)制；（3）60℃ 30min，pH3-9 。,十 圓環(huán)病毒科(Circoviridae),,一、主要特征,二、主要成員 包括豬、禽及植物的圓環(huán)病毒，是目前已知最小的動植物病毒,雞貧血病毒(CAV)1979年在日本發(fā)現(xiàn)，曾稱雞傳染性貧血因子(CAA)，現(xiàn)已是養(yǎng)禽業(yè)的世界性問題。 除雞以外不感

19、染其他禽，只有一個血清型。雛雞表現(xiàn)為急性免疫抑制性疾病。由于紅細(xì)胞生成減少造成貧血，血液可成水樣，凝結(jié)緩慢。常發(fā)生繼發(fā)性細(xì)菌感染。本病毒通過直接接觸傳遞，亦可經(jīng)卵垂直傳遞。大多數(shù)雞群均攜帶本病毒。,豬圓環(huán)病毒（PCV）能引起仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（僵豬綜合征）。,雙股RNA病毒,,呼腸孤病毒科和雙RNA病毒核酸類型為雙股RNA，核酸是分節(jié)段的，常常具有較高的變異率。屬于該類的動物較為重要的病毒有藍(lán)舌病毒、輪狀病毒、傳染性囊病病毒

20、。雞的傳染性法氏囊炎是臨床上常見多發(fā)病，對我國乃至世界養(yǎng)禽業(yè)危害極大。,1、主要特征：有囊膜，線性雙股RNA，分節(jié)段，三層衣殼，每層均為20面體對稱 。 （1）藍(lán)舌病毒 綿羊藍(lán)舌病，吸血昆蟲傳播 （2）輪狀病毒 幼齡動物易感發(fā)病，激發(fā)大腸桿菌病情加重,一、呼腸孤病毒科,1．主要特征 ：雙股RNA，無囊膜，20面體對稱，基因組分2節(jié)段，對熱穩(wěn)定 。 雞傳染性法氏囊炎病毒 （1）主要特征 ：2個血清型，1型有致病性

21、，2型無致病性，兩者抗原交叉性差，流行過程中毒力可變強，主要感染25－65日齡雞。 （2）微生物學(xué)診斷 ①制備觸片②瓊擴③雞胚接種④雞源細(xì)胞培養(yǎng)⑤ELISA （3）預(yù)防與控制 疫苗的效果不盡如人意。,雙股RNA病毒科,主要特征：無囊膜，20面體對稱， 32個杯狀殼粒，核酸單股正鏈RNA。 兔出血熱病毒 （兔瘟）家兔野兔出血性敗血癥，2月齡一下幼兔，急性或亞急性敗血癥，死亡率100％，病毒有血凝性

22、，尚未分離到病毒，組織苗可用于預(yù)防。,兔出血熱病毒,嵌杯病毒科,副粘病毒科（Paramyxoviridae）,,病毒多形性，有時呈長絲狀，有囊膜，表面有血凝性和/或神經(jīng)氨酸酶纖突，使細(xì)胞融合，負(fù)股RNA 。,人副粘病毒電鏡照片,人副粘病毒電鏡照片,動物的副粘病毒電鏡照片,新城疫病毒(NDV) 引致雞、火雞、鵝、鴿、鸚鵡等新城疫，已成為世界養(yǎng)禽業(yè)最重要的疾病之一。1.病癥 感染雞 呼吸道、循環(huán)系統(tǒng)、胃腸道紊亂及神經(jīng)

23、癥狀都很明顯，蛋雞可有突發(fā)，生產(chǎn)蛋下降、產(chǎn)薄殼蛋或雞蛋白蛋白減少。 火雞等與雞類似，有呼吸道及神經(jīng)系統(tǒng)癥，最常見氣囊炎。鴨鵝多為隱性感染。人類亦可感染。,2.致病機理 感染 病毒首先在呼吸道及腸道黏膜上皮復(fù)制，借助血流擴散到脾及骨髓，產(chǎn)生二次病毒血癥，從而感染肺、腸及中樞神經(jīng)系統(tǒng)。血清型 NDV只有一個血清型，但毒株毒力有較大差異。 可分成3個類型：強毒型、中毒型和弱毒型。 強毒型又名嗜內(nèi)臟型，致死率可達(dá)100％

24、，引致廣泛的出血性損傷。天然弱毒株已作為疫苗使用。 傳播 病毒通過氣霧、污染的食物及飲水傳播。,3.診斷 必須作病毒分離及血清學(xué)試驗?？扇∑?、腦或肺勻漿，接種10日齡雞胚尿囊腔分離病毒。病毒能凝集雞、人及小鼠等紅細(xì)胞，再作HI試驗鑒別。 4.預(yù)防與控制 新城疫是OIE規(guī)定的A類疫病，許多國家都有相應(yīng)的立法。 控制措施包舌良好衛(wèi)生及免疫。 通常采用由天然弱毒活毒苗及強毒株的油乳劑滅活苗。,朊病毒(prion)是動物

25、與人傳染性海綿狀腦病(TSE)的病原，實質(zhì)上不是傳統(tǒng)意義上的病毒。它沒有核酸，只有傳染性的蛋白質(zhì)顆粒。 早在15世紀(jì)發(fā)現(xiàn)的綿羊的癢病就是由朊病毒所致，1986年在英國發(fā)現(xiàn)的“瘋牛病”(牛海綿狀腦病)，嚴(yán)重打擊了養(yǎng)牛業(yè)，并危及人類健康，震驚全世界，至今余波未平。,朊病毒（Prion）,,“瘋牛病”(牛海綿狀腦病) 病原也是朊病毒。美國科學(xué)家Prusiner獲1997年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎，就是為了表彰其在研究朊病毒的性質(zhì)及其所致的TSE

26、的致病機理所取得的突破性進(jìn)展。,朊病毒蛋白的一張快照表明該蛋白喜歡彼此配對存在,性質(zhì) 朊病毒是細(xì)胞正常蛋白經(jīng)變構(gòu)后而獲得致病性。這種正常的細(xì)胞蛋白名為PrPc。大多數(shù)哺乳動物的基因組均編碼，并在許多組織尤其是神經(jīng)元及淋巴內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)。 PrPc與PrPsc PrP是朊病毒蛋白(prion protein)的縮寫。PrPc是正常細(xì)胞的一種糖蛋白，分子量27000-30000，稱為PrP27-30。PrP27-30是PrP33

27、-35蛋白酶K不完全消化的產(chǎn)物。,朊病毒的特性,,具有反轉(zhuǎn)錄過程的病毒有反轉(zhuǎn)錄病毒科和嗜肝病毒科；嗜肝病毒科在動物疾病方面重要性較差。反轉(zhuǎn)錄病毒科在動物疾病方面的主要特點是多數(shù)病毒具有致腫瘤作用，潛伏期較長。比較重要的動物反轉(zhuǎn)錄病毒有牛白血病病毒、梅迪/維斯納病毒和馬傳染性貧血病毒。,反轉(zhuǎn)錄病毒科,反轉(zhuǎn)錄病毒科,,（1）形狀：球形，有囊膜；（2）衣殼對稱性：二十面體對稱；（3）基因組：為二倍體，由兩個線狀正股單鏈RNA組成；3’

28、端聚A尾；多聚A5’端有帽子結(jié)構(gòu)；能編碼反轉(zhuǎn)錄酶基因； （4）具有三層結(jié)構(gòu)，最內(nèi)層為基因組核蛋白復(fù)合物，包含反轉(zhuǎn)錄酶，螺旋對稱。,一、主要特征,1.可引致腫瘤的病毒甲乙丙丁戊型反錄病毒屬 如禽白血?。饬霾《尽⒇埌籽〔《?、牛白血病病毒等。2.可引起免疫缺陷的多種病毒,二、主要成員,慢病毒屬 如人免疫缺陷病毒1型和2型、牛、猴、貓免疫缺陷病毒、馬傳染性貧血病毒等。,腺病毒科 (Adenoviridae),,二、主要特征,（1）

29、形狀：五鄰體 （2）核衣殼類型：20面體對稱，有纖絲，具血凝性；（3）抵抗力：熱差、冷強、耐干燥、不耐酸； （4）基因組：線狀雙股DNA，無囊膜；（5）核內(nèi)組裝，細(xì)胞崩解釋放。,犬傳染性肝炎病毒 、減蛋綜合征病毒等 。,一、成員,腺病毒電鏡彩色照片,腺病毒結(jié)構(gòu)模擬圖,腺病毒標(biāo)本模擬圖,,1、犬傳染性肝炎病毒 致犬傳染性肝炎，犬狐易感染；病毒經(jīng)鼻咽、口及黏膜途徑進(jìn)入體內(nèi)，最初感染扁桃體、產(chǎn)生病毒血癥，后感染實質(zhì)組織

30、，導(dǎo)致出血及壞死，感染犬通過尿、糞及唾液排毒。,三、重要的腺病毒,2、減蛋綜合征病毒(EDSV) 多發(fā)于產(chǎn)蛋高峰時的雞，除雞以外，鴨及鵝也發(fā)病。感染禽產(chǎn)蛋下降60-80%，產(chǎn)褪色蛋、軟殼蛋或無殼蛋。滅活疫苗效果好。,EDSV病毒電鏡照片,細(xì)小病毒科(Parvoviridae),,（1）形狀：球形 （2）核衣殼類型：20面體對稱 （3）細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制 （4）基因組：線狀單股DNA，無囊膜。,一、主要特征,,,,,,,1、豬細(xì)