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1、在甘肅省河西走廊張掖臨澤蘭州大學(xué)草地生態(tài)實驗站干旱鹽漬地和甘肅天水干旱荒山采得紫花苜蓿和草木犀根瘤菌,對所采菌樣進(jìn)行了培養(yǎng)分離篩選和戈蘭氏染色及BTB實驗,RAPD分子標(biāo)記技術(shù)檢測獲得17株根瘤菌。通過一系列耐鹽堿試驗,最終篩選出的耐鹽堿菌株,對五個紫花苜蓿進(jìn)行了接種效果研究,獲得的主要研究成果如下。 1.以YMA培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基對菌樣培養(yǎng)、戈蘭氏染色及BTB試驗,分離純化出的17個菌株都屬快生型的根瘤菌,菌落呈圓形白色,粘質(zhì)
2、狀,有光澤,邊緣整齊,稍有突起,不吸收或微吸收剛果紅,在YMA-BTB培養(yǎng)基上具產(chǎn)酸特性,鏡檢呈短桿狀能運(yùn)動,戈蘭氏染色為陰性。 2.以分離出的17個根瘤菌菌體基因組DNA為PCR擴(kuò)增的模板,應(yīng)用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行檢測,電泳圖譜顯示的擴(kuò)增條帶將17個根瘤菌菌株區(qū)分為6個不同根瘤菌菌系。 3.6株根瘤菌進(jìn)行一系列耐鹽堿試驗顯示,來自臨澤干旱鹽漬地的根瘤菌株耐鹽堿能力均比天水干旱荒山的強(qiáng)。其中兩株能在pH14的YMA培
3、養(yǎng)基上生長,一株可耐1.539mol/L的NaCl,兩株能耐1.971mol/L的Na2SO4,尤其菌GL007對高pH和幾種鹽都有較強(qiáng)的忍耐性,是實驗篩選出的珍貴耐鹽堿菌種資源。 4.接種GL007于5個紫花苜蓿品種,經(jīng)溫室蛭石盆栽實驗發(fā)現(xiàn)該根瘤菌與5個紫花苜蓿品種都能共生結(jié)瘤,表現(xiàn)出共生效應(yīng)的多樣性。接種該耐鹽根瘤菌的紫花苜蓿與不接種的對照相比其結(jié)瘤數(shù)增加了11.4%~77.7%,有效瘤重增加了26.4%~80.8%,地上生
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