玉米子房離體培養(yǎng)誘導孤雌生殖.pdf

1、玉米是重要的糧食和飼料作物之一.玉米育種的核心是自交系的選育,常規(guī)條件下選育自交系需要4-6年時間,消耗大量的人力物力.通過離體誘導雄核或雌核發(fā)育則可以快速獲得純系,大大縮短了育種時間,提高了育種效率.該研究的目的之一是建立一套有效的誘導玉米離體雌核發(fā)育的技術體系,探討離體雌核發(fā)育的機理.研究了不同授粉處理的玉米子房離體誘導單倍體的效果,比較了不同染色體加倍方法的加倍效果,利用SSR分子標記對子房培養(yǎng)誘導的植株進行了遺傳分析.所獲結果如

2、下:1.玉米子房培養(yǎng)胚誘導培養(yǎng)基為N<,6>+2.4- 3.0mg/L+CH 500mg/L+Pro 690mg/L+AgNO<,3>10mg/L+Sugar3﹪-12﹪;胚分化培養(yǎng)基為MS+KT 0-1mg/L+CH500mg/L+Pro 690mg/L+Sugar3﹪-6﹪;再生植株壯根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.5mg/L+Sugar1.5﹪-2﹪.2.低溫預處理(5℃)有助于玉米子房胚胎的發(fā)生.當授粉時間為15、17小時,未經

3、低溫處理的子房不會產生胚胎,反之則產生胚胎,當授粉時間為15小時,5℃冷藏60小時出胚率為3.33﹪,當授粉時間為17小時,5℃冷藏24小時,出胚率為1.55﹪.3.授粉處理的時間長度是影響誘導效果的重要因素.當授粉時間為15-22小時均可以誘導獲得單倍體,其中誘導率最高的是19小時,誘導率為0.2﹪.但對于溫室材料,授粉時間應延長至26-30小時,其中誘導率最高是29小時,單倍體誘導率為0.18﹪.4.自花授粉處理的效果好于異花授粉.

4、在異花授粉條件下,誘導單倍體所需的授粉時間宜短,在自花授粉條件下,誘導單倍體所需的時間宜長.5.不同季節(jié)授粉處理的效果存在差異.春秋兩季授粉處理的效果好于夏季.春季授粉處理的單倍體的平均誘導率為0.109﹪,秋季為0.105﹪,夏季為0.058﹪.6.在兩年時間共獲得玉米子房再植株281棵,經根尖壓片檢查染色體數(shù)目,有24棵為單倍體植株,其中2棵被加倍成功,另有一種單倍體植株自發(fā)散粉.7.利用20對在兩親本(178,黃C)之間表現(xiàn)多態(tài)性

5、的SSR引物(每條染色體兩對)對部分非單倍體再生植株進行了遺傳分析,其中一個株系在大田生長條件下,株高、株型、穗位等諸多農藝性狀表現(xiàn)出整齊一致,SSR檢測結果表明:該株系在所檢測的20個位點上均表現(xiàn)純合,其中11個位點與黃C一致,其他9個位點與178一致.從而斷定該株系應當是一個自發(fā)加倍的雙單倍體.8.對一個自發(fā)散粉的單倍體株系也進行了SSR檢測,在所檢測的20個位點上同樣式表現(xiàn)純合,其中15個位點與黃C一致,其他5個位點與178一致.