西瓜花藥、子房和子葉離體培養(yǎng)影響因素的研究.pdf

1、西瓜屬于葫蘆科蔬菜作物，是重要的經(jīng)濟(jì)作物之一。長(zhǎng)期以來(lái)，常規(guī)的遺傳育種的周期長(zhǎng)、工作量大、遺傳性狀不穩(wěn)定以及栽培種遺傳基礎(chǔ)狹窄等因素極大的限制了西瓜一代雜種的育種進(jìn)程。因此，如何提高優(yōu)良自交系的選育速度，并對(duì)優(yōu)良單株的保存和利用，成為西瓜一代雜種育種的關(guān)鍵。利用生物技術(shù)手段進(jìn)行種質(zhì)資源創(chuàng)新，可以加快培育和保存優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)的新品種。
　　 本試驗(yàn)采用6個(gè)不同基因型的西瓜自交系為材料，探討了西瓜花藥和未受精子房離體培養(yǎng)發(fā)育途徑和培養(yǎng)過(guò)

2、程中的各種影響因素，并對(duì)各種影響因素范圍進(jìn)行限定，提高西瓜花藥和未受精子房愈傷組織的誘導(dǎo)率，為今后西瓜單倍體植株的研究奠定基礎(chǔ)：此外，研究了西瓜子葉離體培養(yǎng)的技術(shù)體系，為進(jìn)一步完善離體培養(yǎng)再生體系和種質(zhì)資源創(chuàng)新提供依據(jù)。主要結(jié)果如下：
　　 （1）西瓜花藥取材外形特征為：未開花，淺綠色，花蕾縱徑4.5-6.5mm，橫徑4.4-5.1mm，花瓣與花萼大致等長(zhǎng)或稍長(zhǎng)，花蕾明顯膨大，萼片張開。
　　 （2）在花藥誘導(dǎo)愈傷組織的

3、培養(yǎng)中，采用春季盛花期的花藥，在4℃預(yù)處理72h后，愈傷組織誘導(dǎo)率較高，而且愈傷組織生長(zhǎng)迅速、質(zhì)地緊密，有一定的分化潛力；以正交試驗(yàn)篩選出2個(gè)誘導(dǎo)效果比較好的激素配方，分別為KT0.5mg/L+6-BA1.5 mg/L+NAA1.0 mg/L、KT1.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5 mg/L，在此基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)本試驗(yàn)的6個(gè)基因型的材料花藥愈傷組織誘導(dǎo)率有較大的差異，編號(hào)122最高，達(dá)80.34％；以添加30g/L蔗糖

4、和50g/L的葡萄糖效果較好，黑暗培養(yǎng)7天后可以提高愈傷組織誘導(dǎo)率。在愈傷組織增殖和分化培養(yǎng)中，以在MS+NAA1.0mg/L+6-BA0.25mg/L的培養(yǎng)基中愈傷組織增殖效果最好，嘗試調(diào)節(jié)6-BA和IAA的濃度比例仍未能誘導(dǎo)出不定芽。
　　 （3）在未受精子房誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)中，以正交試驗(yàn)篩選出2個(gè)誘導(dǎo)效果比較好的激素配方，分別為2，4-D1.5mg/L+NAA1.0 mg/L+6-BA0.25 mg/L、2，4-D1.0

5、 mg/L+NAA1.0 mg/L+6-BA1.0 mg/L；接種的適宜時(shí)期是開花當(dāng)日，以添加40g/L的蔗糖效果較好，4℃的預(yù)處理72h亦能提高愈傷組織誘導(dǎo)率，基因型的差異與花藥誘導(dǎo)大致相同；添加活性炭對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)率無(wú)明顯的影響。
　　 （4）在子葉離體培養(yǎng)中，篩選出MS+6-BA2mg/L為最佳培養(yǎng)基，并以子葉基部的誘導(dǎo)不定芽的效果較好，添加2mg/L的AgNO3能顯著提高每塊外植體的再生芽數(shù)，生根培養(yǎng)基為MS+IAA0.