定心藤水溶性多糖的研究.pdf

1、定心藤(MappianthusiodoiesHand.MaZZ.)為瑤醫(yī)常用藥材銅鉆，有獨特的藥效，當(dāng)前對定心藤的酮類、萜類及生物堿類化合物等有一定的研究，但對其多糖的研究較少。多糖作為一種生物活性物質(zhì)，具有重要的作用，廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)。定心藤是南方少數(shù)民族地區(qū)的草藥，民族特色濃厚，同時有悠久的民族傳統(tǒng)醫(yī)藥理論可供借鑒。因此對定心藤多糖的研究可更全面的展現(xiàn)其應(yīng)用價值。
　　 本文以定心藤為原料，分析了其水溶性多糖（簡稱DXTc）提

2、取的最佳條件，并測定其理化性質(zhì)，通過分離純化，得到初步純化多糖DXT，各級分多糖DXT1,DXT2,DXT3,DXT4,DXT5及純化多糖DXT51，測定各級分多糖組成和純化多糖結(jié)構(gòu)，并對各級分多糖及DXT51進(jìn)行體外清除自由基活性的研究。上述研究可為了解定心藤多糖的藥理作用、合理利用這種瑤藥提供理論依據(jù)。實驗結(jié)果如下:
　　 正交法分析結(jié)果表明DXTc的最佳提取條件為料液比1∶8，提取溫度80℃，提取時間2h，提取率可達(dá)1.6

3、％。DXTc糖含量為65.66％，蛋白含量為9.91％，糖醛酸含量為15％。
　　 DXTc經(jīng)脫淀粉脫蛋白得到DXT，DXT經(jīng)酸性乙醇分級得到DXT1,DXT2,DXT3,DXT4,DXT5。DXT5經(jīng)DEAE-SephadexA-25柱層析和SephadexG-15純化，得多糖DXT51。DXT51經(jīng)HPLC檢測呈單一對稱峰，紙層析檢驗呈單一斑點，表明DXT51為分子量和極性都均一的純化多糖，相對分子量約為20000。

4、　　 DXT51經(jīng)紙層析和GC分析表明其單糖組成為鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)，不含有半乳糖醛酸。單糖組成摩爾比為Rha∶Ara∶Xyl∶Man∶Gal∶Glc=1.00∶8.90∶0.40∶0.80∶1.20∶6.20。
　　 除GC分析外，還采用了IR、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化及其產(chǎn)物GC-MS、NMR等方法對DXT51的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。

5、結(jié)果表明多糖DXT51具有分枝結(jié)構(gòu)，主鏈由Ara和Glc構(gòu)成，其中α-(1→4)或α-(1→5)糖苷鍵的Ara與α-(1→2)糖苷鍵的Ara連接構(gòu)成多糖DXT51的主鏈之一;Glc以α-(1→6)糖苷鍵連接構(gòu)成多糖DXT51的主鏈之一，且在4位上有分枝，平均每13個糖殘基有5個分枝。支鏈由Rha、Ara、Man、Gal、Glc構(gòu)成，其中Rha以1→3連接，Ara以1→3連接，Man以1→3連接，Gal以1→2連接，Glc以1→3連接。R