南瓜水溶性多糖的結(jié)構(gòu)表征及生物活性的研究.pdf

1、南瓜（Cucurbita）是一種具有顯著經(jīng)濟價值和保健作用的蔬菜作物，南瓜多糖是南瓜中重要的生物活性物質(zhì)，具有降血糖、抗氧化、抗腫瘤、降血脂等功效。本文以本實驗室多年來收集并純化的南瓜自交系為研究對象，以功能型南瓜品種的選育為最終目標，對南瓜多糖的提取、分離、純化工藝進行優(yōu)化，并對不同南瓜品種（系）多糖和不同溫度連續(xù)提取南瓜多糖組分的理化性質(zhì)深入研究，得到如下結(jié)論：
　　 1.南瓜多糖提取、分離純化工藝的優(yōu)化。
　　 （

2、1）影響南瓜水溶性多糖提取率的因素主要有：料液比、浸提時間、溫度、提取次數(shù)。在單因素實驗的基礎(chǔ)上，結(jié)合正交實驗對南瓜多糖的提取工藝進行優(yōu)化。結(jié)果表明影響熱水提取南瓜多糖提取率的因素順序為：時間>溫度>料液比>提取次數(shù)。熱水提取南瓜多糖的最佳工藝為：料液比1：40，70℃水浴，浸提4h，提取2次。
　　 （2）最佳醇沉工藝為：濃縮液與95％乙醇體積比為1：3。
　　 （3）最佳Sevage法脫蛋白工藝為：提取液與氯仿-正丁

3、醇溶液體積比為2：1,振蕩20min，重復6次。
　　 2.不同南瓜品種多糖的理化性質(zhì)。
　　 選取四個（代號為品系1、2、3、4）本實驗室多年選育的南瓜新品系和一個（代號為5）市場主銷品種“蜜本”為研究對象。品系1和品系2是甜度低，口感脆類型南瓜，而品系3、4和市購品種5是甜度高，口感粉類型南瓜。將從品系1、2、3、4和品種5中提取、分離純化的水溶性多糖分別命名為PX1、PX2、PX3、PX4和PZ5，對五個南瓜品種（

4、系）多糖的理化性質(zhì)進行研究得出以下結(jié)論：
　　 （1）PX1、PX2、PX3、PX4和PZ5提取率分別為1.02％、1.13％、1.49％、1.32％和1.69％；中性糖含量依次為23.58％、22.41％、24.51％、24.03％和35.83％；而糖醛酸含量最高的是PX1,達56.49％，最低的是PZ5僅有33.21％。從實驗結(jié)果可知，甜度高的南瓜品種多糖提取率和中性糖含量要高于甜度低的品種，但是甜度高的南瓜品種其糖醛酸含量

5、并不一定是高的。
　　 （2）五個南瓜品種（系）多糖主要有L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-葡萄糖和D-半乳糖組成，PX3、PX4和PZ5還含有少量的D-甘露糖。從各個品種（系）的多糖單糖摩爾比可知，PX1、PX2、PX3和PX4單糖組成以L-阿拉伯糖和D-半乳糖為主。而PZ5單糖含量最多的是D-葡萄糖，這說明不同南瓜品種多糖的單糖組成存在差異。
　　 （3）紅外圖譜分析可知，PX1、PX2、PX3、PX4和PZ5都具有多糖

6、的特征吸收峰，南瓜多糖以呋喃環(huán)和吡喃環(huán)存在，糖苷鍵有α型。
　　 （4）通過對五個南瓜品種（系）多糖溶液的黏度測定可知，南瓜多糖溶液具有聚電解質(zhì)效應，PX1、PX2、PX3、PX4和PZ5的特性黏數(shù)[η]分別為74.29、60.57、85.77、15.82和34.59。從而推測各品種黏均分子量大小順序為Mpx3>Mpx1>Mpx2>Mpz5>Mpx4。
　　 （5）五個南瓜品種（系）多糖對羥基自由基都具有清除作用，并且隨

7、著多糖濃度的增大，其清除能力增強，即存在劑量效應。當濃度為3mg/ml時，清除效果最好的是PX4，達到68.87％。最差的是PX1,僅有45.91％。
　　 （6）五個南瓜品種（系）多糖都具有清除超氧陰離子自由基的作用，當多糖濃度達到5mg/ml時，PX1、PX2、PX3、PX4和PZ5的清除率分別為14.35％、13.43％、16.67％、14.81％和13.89％.
　　 （7）通過對五個南瓜品種（系）多糖的抗氧化性

8、研究表明，PX3、PX4具有強的抗氧化性，因此品系3和4是很好的功能性南瓜育種材料。
　　 3.不同溫度連續(xù)提取南瓜多糖組分的理化性質(zhì)。
　　 本文首次對不同溫度連續(xù)提取南瓜多糖組分的性質(zhì)進行了系統(tǒng)研究。在20℃、40℃、60℃和80℃水浴條件下連續(xù)提取南瓜多糖，獲得四個水溶性多糖組分PP1、PP2、PP3和PP4。通過對它們的組成和性質(zhì)研究得到以下結(jié)論：
　　 （1）提取率最高的是PP1,中性糖含量最高的也是P

9、P1,而糖酸酸含量最高的是PP4，這說明糖酸酸隨著提取溫度的升高其溢出量增加。
　　 （2）四個南瓜多糖組分的單糖主要有L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-葡萄糖和D-半乳糖，其中PP1、PP2、PP3以L-阿拉伯糖和D-半乳糖為主，含量最高的都是D-半乳糖。而PP4以L-鼠李糖和D-半乳糖為主，含量最高的是L-鼠李糖。
　　 （3）四個組分的水溶液具有聚電解質(zhì)效應。PP1、PP2、PP3和PP4的特性黏數(shù)[η]分別為45.5

10、4、115.76、、120.62和155.42。可推測各組分黏均分子量大小順序為PP4>PP3>PP2>PP1,這說明溫度是對多糖進行分級的有效方法，溫度越高提取出來的組分的分子量越大。
　　 （4）四個組分具有清除羥基自由基的能力，并隨著劑量的增大清除能力增強，其中清除效果最好是PP1,清除超氧陰離子自由基能力也存在劑量效應，清除效果最好的也是PP1。
　　 （5）從小鼠體外抗氧化實驗可知，四個南瓜多糖組分對小鼠肝勻漿

11、自發(fā)性脂質(zhì)過氧化有抑制作用。隨著南瓜多糖濃度的增大，抑制能力逐漸增強。能力最強的是PP1。四個南瓜多糖組分對小鼠肝線粒體腫脹有減輕作用。其中效果最明顯的是PP1。
　　 （6）從四個組分的抗氧化活性實驗結(jié)果可知，在低溫條件下提取的PP1的活性最好，這說明南瓜多糖活性成分在低溫條件下提取就可以獲得。
　　 本文的創(chuàng)新點是對兩類具有代表性的南瓜品種多糖的理化性質(zhì)進行研究，為今后功能性南瓜品種的選育提供實驗基礎(chǔ)和理論依據(jù)，并首