狂犬病病毒ERA株糖蛋白全基因、G基因部分片段缺失表達載體的構(gòu)建及其表達初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該實驗根據(jù)已發(fā)表的狂犬病病毒ERA株G基因序列,設(shè)計了九對引物,運用RT-PCR的方法分別擴增出了G基因全序列和G基因的八個部分片段,即G1、G2、G3、G4、G5、G6、G7、G8.將全G基因和G基因的八個片段分別克隆到PMD18-T克隆載體上,用EcoR Ⅰ/BamH Ⅰ酶切pMD-G1、pMD-G3、pMD-G5、pMD-G7,用BamH Ⅰ/Pst Ⅰ酶切pMD-G2、pMD-G4、pMD-G6、pMD-G8,用EcoRⅠ/Ps

2、t Ⅰ酶切pMD-G和桿狀病毒表達載體PAcSG2,回收純化目的片段.將G基因與PAcSG2連接,G1、G2與PAcSG2連接,G3、G4與PAcSG2連接,G5、G6與PAcSG2連接,G7、G8與PAcSG2連接,構(gòu)建了重組桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體PAc-G和重組桿狀病毒缺失突變轉(zhuǎn)移載體PAc-G1G2、PAc-G3G4、PAc-G5G6、PAc-G7G8.每一株均缺失104個氨基酸,缺失部位從第21位氨基酸開始,至第437位氨基酸.設(shè)計了

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