枯草芽孢桿菌BS-8D防治玉米紋枯病（Rhizoctonia solani）的研究.pdf

1、從不同地域和不同生育期玉米植株的根際土壤和莖基部葉鞘分離得到芽孢桿菌菌株(Bacillusspp.)800多株。通過室內(nèi)平板抗生作用測(cè)定，得到對(duì)玉米紋枯病菌(Rhizoctoniasolani)有拮抗作用的菌株36株，抑菌圈直徑達(dá)到10.50～35.23mm。再經(jīng)室內(nèi)離體葉鞘防病試驗(yàn)、盆栽防病促生試驗(yàn)，溫室和田間小區(qū)防病試驗(yàn)篩選出了具有較好防病和促生能力的枯草芽孢桿菌菌株(BacillussubtilisBS-8D)，研究結(jié)果如下：

2、 1、采用平板對(duì)峙培養(yǎng)法檢測(cè)了BS-8D菌株對(duì)不同病原真菌的拮抗作用，結(jié)果表明：BS-8D菌株對(duì)玉米紋枯病菌(R.solani)有較好的抑制作用，抑菌圈直徑達(dá)35.0mm。此外，該菌株還對(duì)玉米大斑病菌(Exserohilumturcicum)、玉米小斑病菌(Bipolarismaydis)、玉米新月彎孢菌(Curvularialunata)、小麥赤霉病菌(Fusariumgraminearum)、茄子黃萎病菌(Verticilliu

3、mdahliae)、油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)、麥冬炭疽病菌(Colletogloeosporioides)等供試病原菌具有較強(qiáng)的拮抗作用。表明BS-8D菌株對(duì)病原真菌具有廣譜抑菌效果。 2、盆栽防病促生試驗(yàn)表明：BS-8D菌株對(duì)玉米紋枯病菌的侵染有較好的抑制作用，對(duì)玉米苗期生長(zhǎng)也有一定的促進(jìn)作用。種子拌菌和土壤接種拮抗菌菌液后，出苗第14d測(cè)定防病效果顯示，對(duì)照處理的發(fā)病率為85.5％，病斑

4、高度為3.82cm；而BS-8D菌液處理的病株率為54.5％，病斑高度為1.87cm。BS-8D菌株防病效果接近井岡霉素。出苗第15d，BS-8D處理植株生理指標(biāo)與空白對(duì)照相比，株高增加了13.09％，地上部濕重增加了22.68％，地下部濕重增加了11.11％，地上部干重增加了16.48％，地下部干重增加了15.68％。 3、溫室和田間小區(qū)成株期防病試驗(yàn)表明：在玉米苗期、拔節(jié)前期和大喇叭口期向植株莖基部和根圍土壤噴施BS-8D菌

5、液，能延緩病菌對(duì)植柣的侵染。與對(duì)照相比，能顯著降低病斑垂直上升高度，接近井岡霉素的防病效果。 4、采用抗利福平標(biāo)記突變BS-8D菌株測(cè)定其定殖能力的結(jié)果顯示：該菌株在玉米葉鞘、根際土壤和非根際土壤中均具有較好的定殖能力，施用10多天后仍能保持較高密度。葉鞘表面噴霧接種BS-8D菌株8d后，菌體密度達(dá)到最大值，約為2.14×l05CFU/cm2，相當(dāng)于初始菌量的1.91倍；盆栽玉米幼苗土壤接種BS-8D菌株14d后，根際菌量達(dá)到最

6、大值，約為3.89×105CFU/株，相當(dāng)于初始菌量的64.57％。而在非根際土壤中，接種8d后菌體密度達(dá)到最大，約為2.14×106CFU/g，相當(dāng)于初始菌量的35.48％。試驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)種子細(xì)菌化處理后，BS-8D菌株會(huì)隨著種子的發(fā)芽、出苗和生長(zhǎng)向上、下移動(dòng)，在玉米幼苗根部、莖基部定殖和生存，出苗第12d根際和莖基部菌量分別為4.07×104CFU/株和1.28×102CFU/株。 5、對(duì)BS-8D菌株拮抗機(jī)理研究發(fā)現(xiàn)：BS-

7、8D菌株無菌發(fā)酵濾液能使R.solani正常菌絲體變?yōu)榍蛐?、橢圓形或念珠狀等畸形，原生質(zhì)體外溢，菌絲裂解和斷裂，還對(duì)R.solani菌核萌發(fā)有較好的抑制作用。無菌濾液對(duì)熱和在酸性與中性條件下有較好的穩(wěn)定性。BS-8D菌株抗菌物質(zhì)的提取和分離結(jié)果表明，該菌株的抗菌物質(zhì)主要為多肽類的小分子量物質(zhì)，提取物的抑菌圈直徑達(dá)24mm；此外，BS-8D菌株分泌的一些蛋白類物質(zhì)也具有一定的抑菌作用，抑菌圈直徑為8mm，SDS-PAGE電泳發(fā)現(xiàn)，抗菌粗蛋