不同n-6-n-3多不飽和脂肪酸比值高脂負(fù)荷膳對餐后糖脂代謝影響及抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制研究.pdf

1、餐后階段是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)鍵時(shí)期，膳食中脂肪酸組成直接影響餐后代謝過程，高脂負(fù)荷試驗(yàn)是檢查餐后代謝的常用方法之一。n-6和n-3 PUFAs在生物體內(nèi)都發(fā)揮重要作用，這兩族PUFAs在功能上相互協(xié)調(diào)制約，共同調(diào)節(jié)生物體的生命活動(dòng)。目前有關(guān)高脂膳中不同n-6/n-3 PUFAs比值對高甘油三酯患者餐后代謝影響，進(jìn)而影響動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程的研究較少。因此本文對正常及高甘油三酯人群進(jìn)行了不同n-6/n-3PUFAs比值高脂流質(zhì)膳的負(fù)荷試驗(yàn)研

2、究，并建立泡沫細(xì)胞作為動(dòng)脈粥樣硬化細(xì)胞模型探討其作用機(jī)制，研究主要分為三個(gè)部分:
　　第一部分，南京市中老年居民膳食脂肪酸攝入情況調(diào)查及分析
　　目的:分析南京市中老年居民的膳食脂肪酸攝入量、組成及主要脂肪酸的食物來源。方法:利用食物頻率調(diào)查法，結(jié)合食物成分表及文獻(xiàn)資料的脂肪酸數(shù)據(jù)庫，對1096名45歲以上的南京市中老年居民的膳食脂肪攝入量、組成及食物來源進(jìn)行分析。結(jié)果:南京市中老年居民每人攝入的脂肪為119.2g/d，其供

3、能比為38.57％。SFA、MUFA和PUFA攝入量分別為28.07、39.08、40.56g/d，SFA∶ MUFA∶ PUFA為1∶1.39∶1.45，n-6/n-3 PUFAs比值為12.70。結(jié)論:南京市中老年居民膳食結(jié)構(gòu)中脂肪供能比偏高，n-6/n-3 PUFAs比例偏高，應(yīng)降低脂肪攝入量特別是n-6 PUFAs的攝入。膳食中應(yīng)降低肉類的攝入量，增加魚蝦和海藻類食物的攝入以及食用油多樣化，才能有效保證膳食中脂肪酸的平衡，這對于

4、中老年人預(yù)防相關(guān)慢性疾病的發(fā)生具有重要的意義。
　　第二部分，不同n-6/n-3 PUFAs比值的高脂負(fù)荷流質(zhì)膳對正常及高甘油三酯人群餐后糖脂代謝的影響
　　目的:配制不同n-6/n-3 PUFAs比值的高脂負(fù)荷流質(zhì)膳，對正常及高甘油三酯人群進(jìn)行高脂負(fù)荷試驗(yàn)，研究不同n-6/n-3 PUFAs比值對餐后糖脂代謝的影響。方法:對正常(57人)和高甘油三酯（40人）人群進(jìn)行n-6/n-3=1（Ⅰ亞組）、n-6/n-3=5（Ⅱ亞組

5、）、n-6/n-3=10（Ⅲ亞組）的高脂流質(zhì)膳負(fù)荷試驗(yàn)共131人次，采集各時(shí)間點(diǎn)血樣，測定糖脂代謝、炎性因子及血管內(nèi)皮功能相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果:經(jīng)重復(fù)測量方差分析，不同n-6/n-3 PUFAs比值的高脂負(fù)荷流質(zhì)膳對兩組人群餐后血脂、血糖、炎癥及血管內(nèi)皮功能反應(yīng)的影響差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;同一亞組中兩組人群TG和NO餐后反應(yīng)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ⅱ和Ⅲ亞組中兩組人群INS餐后變化趨勢無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。高甘油三酯人群餐后TG、GLU、INS和NO最大變化

6、值及曲線下增加（或減少面積）均高于正常組;Ⅱ亞組中兩組人群餐后TG和INS的最大變化值及TG曲線下增加面積其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Ⅲ亞組中兩組人群的餐后TG、INS及NO最大變化值和曲線下增加（或減少）面積差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:高甘油三酯人群存在餐后糖脂代謝紊亂，是動(dòng)脈粥樣硬化的高發(fā)人群。不同n-6/n-3PUFAs比值可能并不能急劇影響餐后糖脂代謝、炎性反應(yīng)及血管內(nèi)皮功能，但是高n-6/n-3 PUFAs比值的高脂負(fù)荷膳能夠加劇高甘

7、油三酯和正常人群間的差異。通過降低n-6/n-3 PUFAs比值或許能夠縮短兩組人群之間的差距，從而預(yù)防高甘油三酯患者動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。
　　第三部分，不同n-6/n-3PUFAs比值對THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞形成的影響及機(jī)制研究
　　目的:研究n-6 PUFAs（花生四烯酸，AA）與n-3 PUFAs（二十碳五烯酸， EPA）不同比值對THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞形成的影響，探討其預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)機(jī)制。

8、方法:將THP-1單核細(xì)胞， PMA和ox-LDL共同培養(yǎng)建立泡沫細(xì)胞模型，在細(xì)胞泡沫化過程中以濃度為100μM的n-6/n-3 PUFAs低、中、高比值（分別為1，5，10）的脂肪酸處理細(xì)胞48小時(shí)后，采用酶法測定細(xì)胞內(nèi)膽固醇及膽固醇酯含量，采用ELISA試劑盒測定細(xì)胞上清液中IL-6及TNFα含量，采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR測定CD36，ABCA1，ACAT1，PPARγ及LXRα mRNA表達(dá)。結(jié)果:與模型組比較，低比值和中比值干預(yù)組

9、細(xì)胞內(nèi)膽固醇及膽固醇酯均降低，并存在顯著性差異，但高比值組與模型組比較略有增加。不同n-6/n-3 PUFAs比值的脂肪酸具有抑制細(xì)胞分泌IL-6及TNFα的作用，分泌量與比值存在劑量效應(yīng)關(guān)系;不同n-6/n-3 PUFAs比值的脂肪酸能夠下調(diào)CD36、ACTA1、PPARγ、LXRα mRNA的表達(dá)，并存在比值效應(yīng)關(guān)系。結(jié)論:降低n-6/n-3 PUFAs比值能夠通過抑制炎性因子的分泌下調(diào)CD36 mRNA和ACAT1 mRNA表達(dá)，