食管癌相關(guān)基因1（ECRG1）編碼蛋白質(zhì)的功能研究.pdf

1、ECRG1基因是我室利用差異顯示的方法克隆的一個(gè)食管癌相關(guān)基因.以往研究已表明,它在體內(nèi)外可以抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),這意味著它可能對(duì)食管癌癌變機(jī)理、治療和預(yù)防有著重要意義.為更全面、更深入的認(rèn)識(shí)其作用機(jī)制,本文從三部分展開(kāi)ECRG1編碼蛋白的功能研究.成功地利用畢氏酵母系統(tǒng)表達(dá)了ECRG1蛋白,獲得了一定量的可溶性蛋白,這為進(jìn)一步開(kāi)展蛋白的功能研究提供基礎(chǔ).對(duì)前期酵母雙雜交篩選的ECRG1相互作用蛋白Miz-1展開(kāi)了進(jìn)一步研究,首先利用G

2、ST-put down、免疫共沉淀和免役熒光共定位的方法證實(shí)了兩者的確存在著相互作用,進(jìn)而對(duì)兩者的功能進(jìn)行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),ECRG1和Miz-1在影響細(xì)胞增殖和周期改變方面存在著相互協(xié)調(diào)、相互促進(jìn),它們的相互作用導(dǎo)致了細(xì)胞增殖的抑制和細(xì)胞周期G1的阻滯更顯著,并且還發(fā)現(xiàn)ECRG1和Miz-1的相互作用誘導(dǎo)了P15的表達(dá).我們的研究還發(fā)現(xiàn),ECRG1能誘導(dǎo)NIH3T3細(xì)胞發(fā)生衰老,并可能通過(guò)調(diào)控端粒酶與p21的表達(dá)來(lái)完成這個(gè)生理變化.這可