第一部分：散發(fā)性胰島素瘤中MLH1、MSH2失活導(dǎo)致微衛(wèi)星不穩(wěn)定及其臨床意義;第二部分：α-internexin在胰腺內(nèi)分泌腫瘤中的異常表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、研究目的：散發(fā)性胰島素瘤的分子發(fā)病機(jī)制未明。目前仍缺乏可靠的用于鑒別胰島素瘤良惡性的分子標(biāo)志物。本課題第一部分的研究目的是明確胰島素瘤是否發(fā)生錯配修復(fù)基因失活，從而導(dǎo)致微衛(wèi)星不穩(wěn)定；錯配修復(fù)基因的異常以及微衛(wèi)星不穩(wěn)定是否可用于鑒別該類腫瘤的良惡性和判斷預(yù)后。
　　 實(shí)驗(yàn)方法：用PCR方法檢測61例胰島素瘤的微衛(wèi)星不穩(wěn)定，MLH1基因的雜合缺失和啟動子甲基化。用變性高效液相色譜分析方法測定外顯子突變并DNA測序驗(yàn)證。用免疫組織化學(xué)

2、染色方法檢測MLH1和MSH2蛋白在腫瘤及瘤旁組織中的表達(dá)。分別用單因素和多因素分析方法對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與患者的臨床病理學(xué)資料進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在58個散發(fā)性胰島素瘤中，MLH1和MSH2蛋白表達(dá)下降分別為38％和16％。散發(fā)性胰島素瘤發(fā)生MLH1基因啟動子高甲基化和基因雜合缺失分別為32％和50％。MLH1基因啟動子高甲基化或同時發(fā)生啟動子高甲基化和基因雜合缺失與蛋白的表達(dá)下降顯著相關(guān)(P值分別為0.041和0.02

3、7)。散發(fā)性胰島素瘤中未發(fā)現(xiàn)MSH2基因雜合缺失。1/3的散發(fā)性胰島素瘤發(fā)生高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定，MLH1或MSH2蛋白表達(dá)下降與高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定顯著相關(guān)(P=0.006和0.049)。MLH1和MSH2蛋白表達(dá)同時下降也與高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定顯著相關(guān)(P=0.004)。
　　 與臨床病理相關(guān)分析顯示，高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定、MLH1蛋白表達(dá)下降或MLH1和MSH2蛋白表達(dá)同時下降與腫瘤良惡性顯著相關(guān)(P值分別為2.6×10-5、0.

4、008和0.018)。高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定、MLH1蛋白表達(dá)下降以及同時發(fā)生MLH1和MSH2蛋白表達(dá)下降均為患者未即時治愈的獨(dú)立影響因素(P值分別為0.002、0.011和0.030)。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)論：在散發(fā)性胰島素瘤中MLH1基因的失活與雜合缺失和基因啟動子高甲基化有關(guān)。MLHt和MSH2基因的表達(dá)下降以及高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定可作為鑒別胰島素瘤的良惡性以及輔助判斷患者的預(yù)后的分子標(biāo)志物。錯配修復(fù)基因的異常可能在胰島素瘤的發(fā)生中