駐高原官兵口腔健康狀況調(diào)查和模擬低氧環(huán)境牙周炎菌群多樣性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的及意義:
　　 牙周炎有患病率高,發(fā)病隱蔽,發(fā)病緩慢,病程長(zhǎng)等特點(diǎn),并且與全身健康有關(guān)。在高原環(huán)境下,牙周炎的患病率顯著高于其他地區(qū),高達(dá)70.2％。我國高原人口和駐軍均排在世界第一,但目前高原牙周病的基礎(chǔ)研究較少,本課題通過駐高原官兵和駐平原官兵口腔健康狀況流行病學(xué)抽樣調(diào)查,了解臨床差異。模擬高原低氧環(huán)境,建立牙周炎動(dòng)物模型,研究高原牙周病的菌群多樣性。為高原牙周病的預(yù)防治療提供理論依據(jù)。
　　 高原牙周病患病率高

2、,牙周病又受局部因素和全身因素的綜合調(diào)控,高原氣候在影響牙周病進(jìn)程的同時(shí)是否又對(duì)口腔其他疾病造成影響?高原居住人群口腔健康狀況與平原地區(qū)相比究竟有何差異?因此,了解高原居住人群口腔健康狀況的流行病學(xué)特點(diǎn)對(duì)研究高原牙周病有參考價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)選擇以不同海拔高度的駐軍官兵為研究對(duì)象,進(jìn)行口腔健康流行病學(xué)抽樣調(diào)查,通過對(duì)其口腔保健行為認(rèn)知,牙周健康狀況及齲病的調(diào)查數(shù)據(jù),分析其跟海拔與環(huán)境等因素的相關(guān)程度,從而了解不同海拔高原官兵口腔健康狀況及與平

3、原的差異,掌握與高原特殊環(huán)境的關(guān)系。
　　 牙周炎研究的最新觀點(diǎn)認(rèn)為,局部的細(xì)菌感染是牙周炎發(fā)生和發(fā)展的主要因素,微生物是引發(fā)牙周炎的始動(dòng)因子,齦溝液是牙周炎致病菌的最主要的生態(tài)區(qū),該部位的菌群改變將直接導(dǎo)致牙周炎的形成。但高原牙周病的患病率高于平原是否與高原的特殊環(huán)境及其優(yōu)勢(shì)致病菌不同相關(guān)?為此,我們建立模擬高原低氧環(huán)境牙周炎動(dòng)物模型,應(yīng)用PCR-變性梯度凝膠電泳技術(shù)(Polymerase chain reaction-den

4、aturing gradient gelelectrophoresis,PCR-DGGE)對(duì)動(dòng)物模型齦溝液的致病菌群進(jìn)行多樣性分析,并選擇性地基因測(cè)序,探討導(dǎo)致高原牙周病發(fā)病率高于平原環(huán)境的細(xì)菌學(xué)因素。
　　 方法和步驟:
　　 一、按照全軍口腔健康調(diào)查方案,采用整群抽樣方法選擇高原組駐藏(海拔3700m)850名和平原組駐渝(海拔400m)879名的某兩步兵團(tuán)官兵共1729名,進(jìn)行口腔健康行為學(xué)問卷調(diào)查和口腔疾病(齲病

5、、牙石、牙齦出血、光化性唇炎等)及其他口腔病臨床檢查。調(diào)查數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用x2檢驗(yàn)顯著性水平。
　　 二、80只SD(Sprague-Dawley)大鼠隨機(jī)平分為常氧對(duì)照組、常氧結(jié)扎組、低氧對(duì)照組和低氧結(jié)扎組。結(jié)扎組采用正畸結(jié)扎絲結(jié)扎上頜第一磨牙,并給予高糖飲食建立牙周炎動(dòng)物模型,低氧組置于低壓氧艙建立模擬高原牙周炎動(dòng)物模型,常氧組置于正常環(huán)境飼養(yǎng)。
　　 三、于建模8周后檢測(cè)第一磨牙牙周炎

6、臨床指標(biāo),獲取牙周組織標(biāo)本,HE染色病理組織切片觀察;提取齦溝液細(xì)菌總DNA,使用PCR-DGGE分析齦溝液中牙周炎菌群差異性,選擇特異性DNA條帶,回收測(cè)序并進(jìn)行序列分析。
　　 結(jié)果:
　　 一、高原與平原兩地官兵口腔健康流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果:
　　 1、口腔健康行為學(xué)調(diào)查結(jié)果:高原組(850例)刷牙時(shí)間、刷牙次數(shù)、飯后漱口及定期潔治的行為與平原組(879例)相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)
　　 2、高

7、原組患齲率為37.2％,齲均0.50,齲補(bǔ)率4.9％;平原組患齲率為35.5％,齲均0.39,齲補(bǔ)率8.3％:齲補(bǔ)率高原組明顯低于平原組(p＜0.05);高原組牙石、牙齦出血檢出率為68.7％和30.4％,高于平原組;高原組還查出唇炎患病率為80.6％,與平原組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05)。
　　 二、動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　 1、各項(xiàng)臨床指標(biāo)結(jié)果:與常氧結(jié)扎組相比,低氧結(jié)扎組上頜第一磨牙的牙齦指數(shù)、牙周袋深度和牙松

8、動(dòng)度均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.01)。
　　 2、病理切片HE染色結(jié)果:低氧結(jié)扎組溝內(nèi)上皮網(wǎng)狀變性,膠原纖維水腫變性,大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),牙周膜間隙增寬,牙槽嵴頂及固有牙槽骨吸收、破壞,牙槽嵴處可見較多破骨細(xì)胞位于骨吸收陷窩。
　　 三、PCR-DGGE實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　 1、DGGE圖譜UPGMA相似性聚類分析結(jié)果:各組內(nèi)相似性程度高,而各組之間則相似性較小。低氧組與常氧組齦溝液的菌群的基因型分布之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差

9、異(p＜0.05)。
　　 2、DGGE圖譜的多樣性指數(shù)分析結(jié)果:低氧組的豐富度大于常氧組,結(jié)扎組的豐富度大于對(duì)照組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 3、測(cè)序結(jié)果表明:低氧結(jié)扎組和常氧結(jié)扎組優(yōu)勢(shì)菌不同。
　　 結(jié)論:
　　 1、高原低氧環(huán)境及醫(yī)療保障條件差是駐高原官兵牙周病和唇炎患病率高的重要因素。高原低氧環(huán)境不影響官兵齲患發(fā)生率。
　　 2、部隊(duì)官兵口腔衛(wèi)生知識(shí)普遍缺乏,應(yīng)加強(qiáng)保健指導(dǎo),及