A2B腺苷受體在哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑中的作用.pdf

1、目的：哮喘是一種氣道慢性炎癥性疾病，以持續(xù)的氣道炎癥和肺臟微細(xì)結(jié)構(gòu)改變?yōu)樘卣?，最終導(dǎo)致氣道功能下降，其發(fā)病機制十分復(fù)雜，目前多數(shù)專家認(rèn)為是由于多種炎癥細(xì)胞聚集在氣道黏膜表面，釋放多種可溶性的炎癥介質(zhì)及細(xì)胞因子，引起黏膜充血、水腫，黏液分泌亢進，誘發(fā)氣道高反應(yīng)性，導(dǎo)致氣道平滑肌痙攣；炎癥持續(xù)存在，導(dǎo)致氣道結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，即氣道重塑，是造成哮喘反復(fù)發(fā)作、遷延不愈的主要原因。目前研究發(fā)現(xiàn)腺苷在支氣管哮喘等氣道炎癥性疾病中水平增高，對支氣管痙攣和

2、收縮起著重要的作用，腺苷是一種嘌呤核苷，由ATP在ATP激酶和核苷酸酶的作用下降解去磷酸化而產(chǎn)生，在缺氧缺血或內(nèi)毒素血癥時產(chǎn)生增加，產(chǎn)生后腺苷作為一種強大的細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)分子，通過特定的細(xì)胞膜G蛋白與相應(yīng)受體偶聯(lián)，產(chǎn)生多種效應(yīng)，在慢性肺臟疾病哮喘，腺苷在前炎癥因子及組織破壞方面發(fā)揮其作用，哮喘時氣道重塑的機制還不完全明了，但是越來越多的證據(jù)顯示體內(nèi)腺苷水平增加與氣道重塑有關(guān)。目前證實有四種腺苷受體，它們與腺苷的親和力各不相同，分別為A1

3、、A2A、A2B和A3腺苷受體,這些受體在體內(nèi)廣泛分布，通過多種信號途徑產(chǎn)生多種效應(yīng)，許多研究提示A2B腺苷受體在哮喘發(fā)生發(fā)展中的作用尤為重要，本研究旨在探討A2B腺苷受體在實驗性哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑中的作用，以進一步探討支氣管哮喘的發(fā)病機制。 方法：選取清潔級健康雄性BALB/C小鼠30只，鼠齡6周，適應(yīng)性飼養(yǎng)7天后，按隨機分成3組：正常對照組10只、哮喘模型組10只、氨茶堿治療組10只。正常對照組小鼠分別于第1天，第1

4、3天，第19天腹腔注射生理鹽水0.8ml和氫氧化鋁干粉15mg混合液，第20天起置于5L密閉容器中，以生理鹽水溶液超聲霧化，每次40分鐘，每天1次，連續(xù)霧化25天，每天霧化前腹腔注射生理鹽水0.8ml。哮喘組及氨茶堿組動物處理：小鼠分別于第1天，第13天，第19天腹腔注射0.8ml致敏液(含OVA20μg，氫氧化鋁干粉15mg)，第20天起置于5L密閉容器中，以1％OVA溶液超聲霧化激發(fā)，每次40分鐘，每天1次，連續(xù)霧化25天，哮喘組每

5、天第一次霧化前腹腔注射生理鹽水0.8ml，氨茶堿組每天第一次霧化前腹腔注射安茶堿0.8ml(含氨茶堿20μg/kg)。各組小鼠分別于最后一次霧化后24小時眼球放血處死，取出雙側(cè)肺組織，采用HE染色、免疫組織化學(xué)法結(jié)合計算機病理圖象分析系統(tǒng)測定各組支氣管壁厚度和氣道平滑肌厚度，以及肺組織表達A2B腺苷受體的陽性面積光密度值和灰度值，并采用雙抗體夾心ELISA法測定血清中IL-8的水平，通過觀察哮喘小鼠氣道重塑相關(guān)數(shù)值、血清中IL-8的水平

6、及A2B腺苷受體表達的變化，以探討A2B腺苷受體在哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑中的作用。所得數(shù)據(jù)均用SPSS11.5軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，統(tǒng)計方法為單因素方差分析(one-wayANOVA)，最小顯著差異法(LSD法)進行不同組別之間的兩兩比較，兩變量間的相關(guān)分析采用線性相關(guān)分析(Bivariate過程)，以P＜0.05作為顯著界限。 結(jié)論： 1.哮喘小鼠支氣管管壁及平滑肌增厚，氣道不同程度狹窄變形，肺間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤，

7、血清IL-8水平明顯增高，提示哮喘時多種炎癥細(xì)胞在氣道聚集，通過分泌釋放多種炎癥介質(zhì)，參與哮喘時氣道炎癥及氣道重塑的發(fā)生發(fā)展。 2.哮喘小鼠氣道上皮細(xì)胞中A2B腺苷受體表達明顯增多，且與血清中炎癥介質(zhì)IL-8的含量增加呈直線相關(guān)，表明哮喘時多種因素誘導(dǎo)A2B腺苷受體表達增加，通過促進IL-8釋放，造成哮喘小鼠氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性及氣道重塑這些病理改變。 3.氨茶堿治療后的哮喘小鼠，其氣道上皮細(xì)胞中A2B腺苷受體表達較哮