抗TCR抗體誘導正常和NOD小鼠胸腺細胞陰性選擇.pdf

1、該文根據抗TCR單克隆抗體對正常BALB/C及自身免疫性糖尿病模型NOD小鼠胸腺細胞陰性選擇的誘導研究,得出以下結論.1.抗TCR抗體、PMA、Con A誘導胸腺及外周T細胞的活化分裂,我們用CFSE標記細胞、流式細胞儀分析法檢測,證明此法不僅可以測定單細胞水平上細胞的分裂,還可根據熒光強度判斷細胞的分裂次數.2.正常BALB/C小鼠胸腺不同亞群T細胞對抗TCR抗體誘導敏感性有差異,CD3<'->CD4<'->(三陰TN)、CD8<'+

2、>CD3V<'->、CD3<'+>CD4<'+>CD8<'->(單陽SP)、CD3<'+>CD4<'->CD8<'+> SP細胞出現不同變化,TN細胞相對耐受凋亡,而CD8<'+>CD3<'->、DP細胞對凋亡誘導敏感.3.胸腺和脾臟表面CD3、CD4、CD8的表達與性別無明顯關系,6-9周小鼠脾臟CD<'+>細胞明顯多于3-4周小鼠;胸腺細胞的增殖與年齡、性別無關,而3周雌性小脾細胞對PMA+IONO刺激事的增殖應答比雄性明顯,4-6

3、周雄小鼠脾細胞的增殖能力強于雄性小鼠,7-8周雌性小鼠脾細胞對抗TCR抗體的應答能力明顯減小.表明免疫系統(tǒng)的雌雄異型可能早于青春期.4.雌、雄不同性別BALB/C小鼠對相同TCR受體誘導凋亡的敏感性有差異,雄性小鼠胸腺細胞的凋亡明顯于雌性.且隨著大量皮質區(qū)CD4<'+>CD8<'+>胸腺細胞的凋亡,CD4<'->CD8<'->細胞、成熟的髓質CD4<'+>CD8<'+>細胞水平無明顯改變.5.anti-CD28 mAb誘導胸腺細胞的凋亡

4、.胸腺T細胞對anti-CD28 mAb或anti-CD28 mAb+CD28 mAb刺激的不同應答與細胞的成熟階段密切相關.胸腺皮、髓質中的胸腺細胞亞群發(fā)生凋亡時,經CD28傳導的胞內途徑均受到影響.6.抗TCR抗體處置后,小鼠成熟髓質區(qū)高表達T細胞受體的單陽性細胞數目成倍增加,皮質區(qū)低表達T細胞受體的不成熟雙陽性細胞數目減少.成熟的單陽性胸腺細胞高表達歸巢受體L-selectin,表型分析(TCRαβ、CD69、HSA、Vβ7-in

5、tegrin、Qa-2)顯示增加的這群細胞為胸腺的新遷出細胞,同時小鼠外周淋巴結及脾臟CD4<'+>、CD8<'+>新遷出細胞數量減少,表明抗TCR抗體能抑制胸腺T細胞向外周遷移.7.與BALB/c小鼠胸腺細胞結果相比較:抗TCR抗體誘導的增殖應答較弱,此種缺乏與年齡及NOD胸腺CD4<'+>CD8<'->和CD4<'->CD8<'+>SP細胞有關.8.與BALB/c小鼠胸腺細胞結果相比較:1)雙信號刺激對NOD和BALB/c CD4<

6、'+>CD8<'+>亞群的明顯促凋亡作用相似;而NOD小鼠髓質6C10<'+>HSA<'hi>CD4<'+>CD8<'->SP細胞對anti-TCRmAb+CD28mAb介導凋亡的敏感性明顯弱于BALB/c小鼠.2)體內抗TCR抗體處置后,NOD髓質6C10<'+>HSA<'hi>CD4SP不成熟單陽細胞的凋亡耐受明顯.表明NOD小鼠胸腺髓質不成熟單陽性細胞亞群的陰性選擇缺乏,反映了NOD小鼠疾病的發(fā)作可能不僅與外周耐受有關、同時與胸腺