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文檔簡介
1、第一部分:DFO對去勢小鼠血清骨鈣素及骨組織影響的初步研究
目的:觀察甲磺酸去鐵胺(DFO)干預(yù)去勢小鼠后血清骨鈣素及骨組織微觀結(jié)構(gòu)的變化。
方法:24只12周齡C57BL/6小鼠,體重(19.5±0.5)g隨機(jī)分為假手術(shù)組(SHAM)、模型組(OVX)、DFO干預(yù)組(OVX+DFO),每組8只。DFO干預(yù)組于卵巢切除后第二天腹腔注射甲磺酸去鐵胺(DFO),劑量為30 mg/kg,每周3次,共5周;模型組、假手術(shù)組均
2、腹腔注射同等劑量0.9%生理鹽水,共5周;第5周末取血后處死小鼠并分離子宮、左側(cè)股骨;ELISA試劑盒檢測血清骨鈣素、血清鐵蛋白;分析天平稱子宮重量;Micro-CT掃描股骨末端并取感興趣區(qū)進(jìn)行三維重建,獲取骨小梁、骨皮質(zhì)三維結(jié)構(gòu)圖像,進(jìn)行松質(zhì)骨、皮質(zhì)骨定量分析。
結(jié)果:1.血清骨鈣素、血清鐵蛋白:DFO干預(yù)組均顯著低于模型組、假手術(shù)組(P<0.05);2.松質(zhì)骨、皮質(zhì)骨骨密度:DFO干預(yù)組均顯著低于模型組、假手術(shù)組(P<0.
3、05),骨小梁厚度、骨小梁間隔DFO干預(yù)組顯著增加(P<0.05),骨小梁數(shù)量、骨體積分?jǐn)?shù)DFO干預(yù)組顯著降低(P<0.05)。
結(jié)論:一定劑量的DFO(30mg/kg)可以使去勢小鼠血清鐵蛋白水平比正常對照組低,同時(shí)也使骨組織形成指標(biāo)降低,加重骨質(zhì)疏松。
第二部分:DFO對去勢大鼠骨代謝指標(biāo)及骨組織影響的實(shí)驗(yàn)研究
目的:觀察甲磺酸去鐵胺(DFO)對骨質(zhì)疏松大鼠(去勢模型)血清骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)及骨微觀結(jié)構(gòu)的影響。
4、
方法:40只雌性3月齡SD大鼠,體重(260±20)g,隨機(jī)分為假手術(shù)組(SHAM)、模型組(OVX)、DFO干預(yù)組(OVX+DFO),DFO干預(yù)組再分3個(gè)濃度組:50mg/kg(L)、100mg/kg(M)、200mg/kg(H),實(shí)驗(yàn)共分為5組,每組8只;DFO干預(yù)方法:卵巢切除后第2周腹腔注射DFO,每周3次,共11周;模型組、假手術(shù)組均同時(shí)腹腔注射等劑量0.9%生理鹽水;實(shí)驗(yàn)過程中每周監(jiān)測大鼠體重;第12周末3.6%
5、水合氯醛麻醉大鼠,心臟取血后處死大鼠并分離雙側(cè)股骨及左側(cè)脛骨;然后,ELISA試劑盒檢測血清鐵蛋白、雌激素、中段骨鈣素、I型膠原羧基末端肽(CTX),原子吸收法檢測脛骨鐵含量,Micro-CT掃描左側(cè)股骨末端(感興趣區(qū)重建骨小梁三維結(jié)構(gòu)圖,行計(jì)算機(jī)松質(zhì)骨定量分析),右股骨末端行HE染色觀察骨小梁情況。
結(jié)果:1. SHAM與OVX組在血清雌激素水平、Micro-CT指標(biāo)中存在顯著差異,說明骨質(zhì)疏松模型制作成功,SHAM組可以作
6、為正常對照、OVX組可以作為骨質(zhì)疏松對照;2.各組血清鐵蛋白未見顯著差異(P>0.05),H組脛骨鐵含量顯著低于其他各組(P<0.05);3.三個(gè)干預(yù)組中,L、M濃度組“骨鈣素”和“CTX”水平明顯低于OVX組(P<0.05),H濃度組與OVX組無差異;4. L、M濃度組骨微觀結(jié)構(gòu)指標(biāo):骨小梁數(shù)量、骨小梁體積、骨小梁厚度、松質(zhì)骨骨密度顯著高于OVX組(P<0.05)且M濃度組上述微觀指標(biāo)顯著高于L組,H濃度組與模型組無顯著差異(P<0.
7、05);M濃度組骨微觀結(jié)構(gòu)(SMI、骨小梁間隔)較SHAM組顯著升高而明顯低于200mg/kg濃度組及模型組(P<0.05);各組皮質(zhì)骨微觀結(jié)構(gòu)未見明顯異常。5. OVX組、H組大鼠股骨遠(yuǎn)端骨小梁較SHAE組稀疏,而L、M組大鼠股骨遠(yuǎn)端骨小梁密度高于OVX組、H組。
結(jié)論:三個(gè)不同劑量DFO干預(yù)大鼠骨質(zhì)疏松模型后,M劑量組的血清骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)、骨微觀結(jié)構(gòu)指標(biāo)、股骨遠(yuǎn)端HE染色與OVX組存在顯著差異;實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示:一定劑量的DFO對
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