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文檔簡介
1、目的:檢測肝癌細(xì)胞SMMC-7721與張氏肝細(xì)胞中miRNA-224的表達(dá)情況。針對肝癌相關(guān)miRNA-224設(shè)計相應(yīng)的反義寡核苷酸(AMO-miR-224),觀察反義寡核苷酸AMO-miR-224對人肝癌細(xì)胞SMMC-7721生物活性的影響,并對其機(jī)制進(jìn)行探討。 方法:體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞SMMC-7721與張氏肝細(xì)胞,并利用實(shí)時熒光定量PCR檢測miRNA-224的表達(dá)情況;臺盼藍(lán)拒染法篩選出AMO-miR-224作用于SMMC
2、-7721的最佳作用濃度與最佳作用時間;經(jīng)AMO-miR-224作用后,流式細(xì)胞儀檢測SMMC-7721細(xì)胞的凋亡情況;實(shí)時熒光定量PCR檢測細(xì)胞miRNA-224的水平變化。 結(jié)果:肝癌細(xì)胞SMMC-7721中miRNA-224的表達(dá)是張氏肝的9.54倍;濃度為0.3μmol/L的AMO-miR-224作用于SMMC-772148小時后,能夠抑制細(xì)胞的生長,且濃度增加抑制效果更明顯;同樣的條件下,AMO-miR-224也能夠促
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