龍芩草含片的藥學、藥效學及作用機制探討.pdf

1、1．目的 本研究在中醫(yī)藥理論指導下，將中藥地龍、黃芩、甘草進行有效部位提取，而制成龍芩草口含片。通過藥學、藥效學及其相關(guān)作用機制的研究，成分基本明確、藥效可以肯定、質(zhì)量能夠控制，進而確定合理的制劑工藝，建立科學的質(zhì)量控制標準；并通過口腔粘膜給藥(龍芩草口含片)，提高生物利用度，增進療效。 2．方法 研究內(nèi)容主要包括：龍芩草口含片的制劑工藝、龍芩草口含片的質(zhì)量標準研究、龍芩草處方部分藥效學研究、口腔粘膜毒性實驗研究

2、以及家兔體內(nèi)血藥濃度的測定。 龍芩草組方由地龍、黃芩、甘草組成，結(jié)合病毒感染所致的流感、上呼吸道感染等癥特點，遵循中醫(yī)藥理論配伍規(guī)律，經(jīng)藥理學篩選得到最佳處方，運用現(xiàn)代制藥新技術(shù)，經(jīng)高效提取分離有效部位制成經(jīng)口腔粘膜給藥制劑，具有清肺利咽，解毒瀉熱之功效。 (1)龍芩草口含片制備工藝：地龍采用生物化學方法提取有效成分，黃芩依《中國藥典》2005年版一部黃芩提取物項下要求、甘草依國家藥品標準WS-10001(HD1269)

3、-2002項下甘草酸單銨鹽有關(guān)規(guī)定；用HPLC方法控制黃芩苷含量；依照口含片的制劑要求確定各步參數(shù)，從而確定制備工藝。 (2)龍芩草口含片質(zhì)量標準：采用薄層色譜法對方中黃芩、甘草、地龍進行定性鑒別，用HPLC方法對方中黃芩苷進行含量測定，確定制劑黃芩苷含量限度；并按《中國藥典》附錄制劑通則口含片項下規(guī)定制定檢查項目。 (3)龍芩草制劑藥效學實驗：采用大腸桿菌內(nèi)毒素致日本大耳白家兔發(fā)熱模型，觀察龍芩草制劑的解熱作用及其對T

4、NF-α的影響；用小鼠氨水引咳法，觀察龍芩草制劑對模型小鼠的鎮(zhèn)咳功效；龍芩草口含片粘膜毒性實驗，觀察粘膜及內(nèi)臟各項指標及制作病理切片。 (4)龍芩草口含片家兔體內(nèi)藥代動力學實驗：實驗采用家兔經(jīng)口腔粘膜給藥與口服給藥兩種途徑，分別在不同時間取血，測得相應時間點的血藥濃度，比較兩種給藥途徑的血藥濃度，計算相對生物利用度；經(jīng)霧化給藥，剝離家兔口腔粘膜，測定粘膜內(nèi)含藥量情況。 3．結(jié)果 (1)龍芩草口含片制備工藝：用生物

5、化學方法提取地龍有效成分，保證地龍中各種酶的活性；檢測得到黃芩提取物中黃芩苷含量85.5％、甘草提取物中甘草酸單銨鹽含量75％，均符合規(guī)定。 (2)龍芩草口含片質(zhì)量標準：確定了薄層色譜方法；規(guī)定了檢查項目；制定了制劑黃芩苷含量限度，每75mg(每片)樣品黃芩苷含量不低于5.0mg，實驗方法學考察均符合要求。 (3)龍芩草口含片藥效學實驗：對于脂多糖致家兔發(fā)熱模型有顯著的解熱作用(P<0.01)，且劑量增大時作用增強，實驗

6、顯示脂多糖可刺激AT Ⅱ細胞分泌TNF-α，而龍芩草制劑能夠抑制TNF-α的異常增加；龍芩草口含片中劑量組對氨水引咳的小鼠的咳嗽次數(shù)明顯減少，并與空白組相比較，具有極顯著差異(p<0.01)，其他各組無明顯改變(P>0.05)；龍芩草口含片粘膜毒性實驗顯示：組織臟器均無明顯病理變化，可以認為無毒。 (4)龍芩草口含片家兔體內(nèi)藥代動力學實驗：兩種給藥途徑都大約在70min時血藥濃度達峰值，且經(jīng)口腔粘膜給藥峰值時的血藥濃度是灌胃給藥