EGFP突變G719X與非小細胞肺癌——從基礎到臨床.pdf

1、學校代碼：學號：EGFR突變G719X與非小細胞肺癌從基礎到臨床專業(yè)年級：北京協(xié)和醫(yī)學院臨床醫(yī)學專業(yè)2007級姓名：周杰導師：李澤堅教授北京協(xié)和醫(yī)學院臨床學院北京協(xié)和醫(yī)院胸外科李單青教授北京協(xié)和醫(yī)學院臨床學院北京協(xié)和醫(yī)院胸外科完成日期：2015年6月10023200701042摘要研究背景：肺癌是世界范圍內癌癥致死的首位病因。以表皮生長因子受體為靶點的小分子酪氨酸激酶抑制劑(EGFRTKIs)，在含特定EGFR基因突變肺癌患者中取得了顯

2、著的用藥反應性以及較好的臨床療效。EGFR基因突變中，以19號外顯子上缺失突變delEl9，及21號外顯子上點突變L858R，突變率最高，對TKIs藥物反應最好。相反的，T790M點突變是最常見的TKIs耐藥突變。除上述突變外，EGFR基因其他位點突變，如G719X(X代表A／S／C)、L861Q、$7681等，臨床上突變率較低，且常常傾向于以聯(lián)合突變的形式存在。充分認識這些突變基因與非小細胞肺癌發(fā)生的關系，以及含有這些突變基因的患者對

3、TKIs藥物的反應性，可以讓我們更充分的認識肺癌發(fā)病機理，并指導臨床實踐。研究方法與對象：本文克隆并構建含EGFR野生型及L858R、G719A、G719S、G719AL861Q聯(lián)合突變基因的載體，通過BactoBac桿狀病毒表達系統(tǒng)，從昆蟲細胞sf9中表達并純化出野生型及突變蛋白。嘗試通過表面等離子共振(SPR)技術研究蛋白與TKIs親和力，通過商品化試劑盒探索突變蛋白的激酶活性以及TKIs對激酶活性的抑制作用。同時，回顧全國5125

4、例在2009年至2012年接受EGFR基因檢測的患者，和北京協(xié)和醫(yī)院489例2010年至2014年接受EGFR基因檢測的患者，收集其中含G719X基因突變的患者包括性別、年齡、吸煙史、病理類型、治療措施、腫瘤分期、無進展生存期和總生存期在內的臨床資料，分析G719X突變患者的臨床特征及對治療的反應性。研究結果：通過研究我們成功分離并純化了野生型及含L858R、G719A、G719S、G719AL861Q突變的EGFR酪氨酸結構域蛋白；通

5、過蛋白激酶實驗測得10uM／ml的各種蛋白其磷酸化底物多肽分子比例分別為：G719AL861Q703‰L858R4269％；G719A2667％；G719S2215％，Wt1234％。全國5125例患者中，G719X突變49例，突變率10‰其中G719A占633‰G719S占245‰G719C占122‰聯(lián)合突變共16例，占327％。而協(xié)和醫(yī)院489例患者中，G719X突變共13例，突變率為26‰其中G719A占462‰G719S占231

6、‰G719C占308‰聯(lián)合突變共6例，占462％。在接受隨訪的患者中，IliAIV期的患者(5名)使用TKIs類藥物獲得5—22個月的無進展生存期，總生存期均在10個月以上。研究結論：聯(lián)合突變G719AL861Q突變蛋白激酶活性大于G719A，G719A大于G719S，相對應的臨床數據中，G719A突變非小細胞肺癌患者多于G719S和G719C。正是由于聯(lián)合突變可以增加EGFR蛋白的激酶活性，因而G719X突變常常和其他非常見突變聯(lián)合出