臍帶血干-祖細胞的體外擴增及擴增后干-祖細胞生物學特性的研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學中國醫(yī)學科學院博士學位論文臍帶血干祖細胞的體外擴增及擴增后干祖細胞生物學特性的研究姓名：翟瓊莉申請學位級別：博士專業(yè)：病理與病理生理學指導教師：韓忠朝邱錄貴2002.5.1薛士筍往矗立1苷要粒酶催化亞單位一一hTERTmRNA水平表達的變化，進一步評價了擴增后UCBHSPC的增殖和自我更新能力。／(結果：(1)本研究的培養(yǎng)體系可有效支持UCBACl33‘細胞的擴增。經(jīng)過兩周的培養(yǎng)，從較早期的ACl33CD34、ACl33

2、CD34、HPPCFU、CFU—GEMM、ACl33及CD34細胞群，到各系定向祖細胞CFUGM和BFUE均得到持續(xù)顯著的擴增；(2)在體外擴增中，發(fā)現(xiàn)ACI33抗原的消失早于cD34，從ACI33／CD34細胞亞群變化推測細胞的分化過程可能是由ACl33CD34一Acl33CD34一ACt33CD34一hCl33一CD34。這一動態(tài)增殖過程提示ACl33是比CD34更為早期的HSPC表面標志；(3)擴增后CD34細胞與原代CD34細胞

3、的端粒酶活性相當或有所升高，提示本研究建立的體外培養(yǎng)體系可保持擴增后HSPC的增殖和自我更新潛能。擴增后HSPC在移植受體內(nèi)重建持久造血的潛能除與其增殖分化及自我更新潛能密切相關，還須具有完整的歸巢功能。由于缺乏合適的方法檢測人HSC的體內(nèi)造血潛能，體外擴增后HSPC的功能特性至今仍未完全明了。歸巢過程包括粘附和遷移，原代HSPC粘附和趨化方面的研究已有很多報道，但有關體外擴增對HSPC歸巢相關功能影響的體外研究還很少，對擴增后HSPC

4、粘附和遷移功能的系統(tǒng)研究無疑將為進一步優(yōu)化UCBHSPC的體外擴增體系和擴增后基于該領域的研究現(xiàn)狀和第一部分的實驗結將CD34細胞從擴增產(chǎn)物中再次純化出來，從動態(tài)的角度觀察了擴增過程中UCBCD34細胞歸巢相關細胞粘附分子(CAMs)的表達、粘附功能、趨化功能和趨化因子受體CXCR4表達的變化，從而評價細胞因子介導的簽叢芷燮對UCBHSPC體外歸巢相關功能的影響。(這也是本研究的創(chuàng)新之處和重點所在結果：(1)幾種與歸巢密切相關的粘附分子