兩種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物微衛(wèi)星標(biāo)記的跨種擴(kuò)增及遺傳多樣性分析.pdf

1、世界上最大的淡水龜—大鱷龜(Macroclemys temminckii)是我國的引進(jìn)種，野生資源分布于北美洲，是集食用、觀賞、藥用于一身的水產(chǎn)肉類經(jīng)濟(jì)動(dòng)物。近二十年中，由于過度的捕殺，野生大鱷龜?shù)臄?shù)目逐漸下降，已被列為世界瀕危野生動(dòng)物保護(hù)紅皮書名錄，其保護(hù)生物學(xué)的研究受到廣泛的關(guān)注。背瘤麗蚌(Lamprotula leai)是麗蚌屬中產(chǎn)量大、分布廣的常見種之一，其貝殼厚實(shí)，肉可以食用或做飼料，也是大型有核珍珠珠核的主要原材料，具有較高

2、的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。我國安徽、江蘇、浙江、江西等省的大、中型湖泊及河流中均有分布，是我國特有的淡水經(jīng)濟(jì)貝類。人為的過度捕捉、環(huán)境污染等因素使得野生資源數(shù)目越來越少，分布的區(qū)域也在急劇縮小。目前背瘤麗蚌已被確定為安徽省一級(jí)保護(hù)水生野生動(dòng)物和湖北省二級(jí)保護(hù)動(dòng)物。
　　大鱷龜和背瘤麗蚌都是我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的熱門品種，帶動(dòng)了地區(qū)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。目前為止，兩個(gè)物種的種質(zhì)資源信息尚不完善，國內(nèi)對(duì)于二者的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)研究尚未涉及。理論的研究不足與當(dāng)今的

3、養(yǎng)殖迅猛趨勢極不相稱，這極大阻礙了兩種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展。為了建立種質(zhì)資源及為分子育種提供遺傳資料，更好地保護(hù)野生資源，本研究運(yùn)用跨種擴(kuò)增法篩選了大鱷龜和背瘤麗蚌的微衛(wèi)星標(biāo)記，同時(shí)運(yùn)用本研究獲得的微衛(wèi)星引物分析了兩種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的遺傳多樣性以及遺傳結(jié)構(gòu)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.通過跨種擴(kuò)增法成功篩選8個(gè)具有多態(tài)性的大鱷龜微衛(wèi)星位點(diǎn)并且對(duì)于24個(gè)個(gè)體進(jìn)行了遺傳多樣性分析。共發(fā)現(xiàn)有30個(gè)等位基因，平均為3.75個(gè);觀測雜合度(H

4、(o)）的范圍是0.042-0.955，平均為0.385;期望雜合度(HE)的范圍為0.042-0.812，平均為0.479;多態(tài)信息含量范圍為0.040-0.759，平均為0.423。經(jīng)過卡方檢驗(yàn)，有4個(gè)位點(diǎn)顯著偏離了Hardy-Weinberg平衡(PX49、BHT32、BHT64、Cc-8)，通過Micro-checker對(duì)位點(diǎn)進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)PX49、BHT64微衛(wèi)星標(biāo)記存在無效等位基因，這可能是造成偏離Hardy-Weinber

5、g平衡的主要原因。高密度養(yǎng)殖、樣本的數(shù)目較少也可能是造成偏離Hardy-Weinberg平衡的原因?？傮w上篩選出的8個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)可以進(jìn)一步用于大鱷龜?shù)倪z傳多樣性和群體遺傳結(jié)構(gòu)的研究。
　　2.通過跨種擴(kuò)增篩選得到15對(duì)具有多態(tài)性背瘤麗蚌微衛(wèi)星位點(diǎn)，并對(duì)4個(gè)背瘤麗蚌地理種群:鄱陽湖(PY)、洞庭湖(DT)、洪澤湖(HZ）、安慶湖(AQ)進(jìn)行了遺傳結(jié)構(gòu)分析。結(jié)果顯示:4個(gè)種群總共檢測到114個(gè)等位基因，其中數(shù)目從2到21個(gè)不等，平均等

6、位基因數(shù)為7.6;鄱陽湖擁有最高的觀測雜合度(H(o))0.455，洪澤湖具有最大的期望雜合度(HE)0.868。背瘤麗蚌4個(gè)群體在各個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)信息含量和遺傳雜合度都較高，遺傳多樣性較豐富，具有較好的群體遺傳結(jié)構(gòu)。檢測發(fā)現(xiàn)所有位點(diǎn)不存在連鎖不平衡現(xiàn)象，表明這些微衛(wèi)星位點(diǎn)可以用來分析物種的遺傳信息。分子變異方差分析表明，12.56％的分化存在于種群間，44.68％的分化存在于種群內(nèi)部。兩兩種群間的Fst值在0.073和0.145之間，全