具C1q抑制活性C1q結(jié)合十二肽的研究.pdf

1、該課題組另辟蹊徑,選擇補(bǔ)體經(jīng)典激活途徑始動分子C1q為靶標(biāo),利用噬菌體肽庫技術(shù),研究可抑制補(bǔ)體激活的C1qR模擬肽.以C1q為釣餌蛋白,親和篩選噬菌體線性十二肽庫并經(jīng)初步鑒定,獲得一批結(jié)合C1q的噬菌體克隆.該實驗對之進(jìn)一步研究,包括以下三個部分.一、C1q結(jié)合性噬菌體克隆的系統(tǒng)鑒定采用U937細(xì)胞配體結(jié)合抑制實驗和AIgG競爭抑制實驗,從結(jié)合C1q的噬菌體克隆中,篩選到14個強(qiáng)陽性克隆.從其展示肽DNA測序結(jié)果推導(dǎo)氨基酸順序,得到9個

2、序列(2個相同序列,4個沒有測出).二、合成肽及其BSA偶聯(lián)物的活性研究從上述9個序列中挑選抑制活性較高的5個序列指導(dǎo)人工合成短肽,一部分合成肽與BSA偶聯(lián),分別采用U937細(xì)胞配體結(jié)合抑制試驗、AIgG競爭抑制試驗、CH50抑制試驗測試其生物學(xué)活性.三、合成肽的改建及活性鑒定根據(jù)前兩部分實驗結(jié)果,我們選擇短肽a加以改建并進(jìn)一步研究.我們篩選、鑒定了一些可抑制補(bǔ)體經(jīng)典途徑激活的C1qR模擬短肽,它們對于補(bǔ)體異常激活有關(guān)疾病的治療具有潛在