溶磷菌YM3-2S溶磷特性及溶磷基因的克隆.pdf

1、磷是生物生長所必需的營養(yǎng)元素，施用磷素一直是保證農(nóng)業(yè)生產(chǎn)增產(chǎn)的重要手段之一，但磷素的大量應(yīng)用也產(chǎn)生了許多環(huán)境問題。溶磷微生物可將土壤中難溶性的磷酸鹽轉(zhuǎn)化為可溶性鹽供作物生長利用，能提高磷肥的利用率，減少土壤對磷酸鹽的吸附固定，避免磷肥過量使用造成環(huán)境污染。因此從土壤中篩選高效溶磷微生物生產(chǎn)生物肥料，以減少磷肥施用量，對農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展，具有重要的生態(tài)和社會意義。 本實驗以四川省7個市縣所采集的土壤為材料，從中分離出具有溶磷能力的細

2、菌，并對其進了鑒定，對其生長特性和溶磷特性進行研究，其結(jié)果如下： 1.從土壤樣品中分離純化出一株高效無機溶磷細菌YM3-2S，對它的生理生化性狀及其16S rDNA進行序列分析后，將其鑒定為洋蔥伯克霍爾德菌Burkholderia cepacia。 2.對該菌株的生長特性和溶磷特性研究表明，YM3-2S代時短，其代時為25min，生長迅速，產(chǎn)酸能力強，對磷礦粉的最大解磷量達40.96 mg/L，其溶磷量隨發(fā)酵液pH值降低

3、而增加，其溶磷能力與其產(chǎn)酸能力密切相關(guān)。 3.抑菌實驗的結(jié)果表明，菌株YM3-2S對玉米大斑病，玉米小斑病，玉米彎孢病，禾谷廉刀病等十幾種病原真菌具有抑制作用。 4.通過紙層析對YM3-2S的發(fā)酵產(chǎn)物進行分析，推測其可能只含有一種有機酸成分，有機酸的成分有待進一步研究。 5.盆栽實驗中不同的處理測定了雅安石灰性紫色土和遂寧石灰性紫色土中速效磷下降順序為CK>CK+NK>CK+磷礦粉+NK>CK+YM3-2S+NK

4、>CK+NK+YM3-2S+磷礦粉+食用菌發(fā)酵料。表明YM3-2S能夠溶解土壤中難溶性磷，從而增加土壤中磷的有效性，改善了土壤供磷情況，促進了土壤中無效磷的溶解。 6.對溶無機磷基因gabY基因克隆后，得到了一個陽性克隆pD6034，核苷酸序列測定表明，D6034與U10242具有97.49％的一致性。核苷酸序列推導的D6034的編碼產(chǎn)物具有28個氨基酸的信號肽，說明該基因編碼產(chǎn)物能直接分泌到胞外。通過SDS-PAGE分析D60