小麥地方品種耐鹽鑒定及耐鹽相關(guān)基因的分析.pdf

1、土壤鹽漬化是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境的主要非生物逆境之一。隨著人口的增加和耕地的減少，如何開發(fā)利用鹽漬化土壤己成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和環(huán)境生態(tài)亟待解決的問題。利用生物技術(shù)深入并展種質(zhì)資源的耐鹽性研究，挖掘其中優(yōu)異耐鹽相關(guān)基因，培育耐鹽作物新品種，是改良和利用鹽漬化土地，增加糧食產(chǎn)量和維持農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展最為經(jīng)濟有效的策略之一。 本實驗以102份小麥地方品種群體為研究材料進行耐鹽性鑒定，選出鑒定結(jié)果呈中間型的群體進行耐鹽基因構(gòu)成分析；同時，利用

2、RT-PCR技術(shù)分離和克隆耐鹽相關(guān)基因，通過原核表達系統(tǒng)表達目的蛋白，旨在為耐鹽小麥種質(zhì)的利用提供理論依據(jù)和應(yīng)用指導(dǎo)。 本研究取得如下研究成果： 1．對102份小麥地方品種進行耐鹽性鑒定，篩選出22份耐鹽性鑒定呈中間型的群體供第四章耐鹽基因構(gòu)成的研究。對鹽處理小麥進行形態(tài)指標的分析，得出結(jié)論：芽期時，相對芽長與鹽害指數(shù)呈顯著的負相關(guān)；苗期時，相對根長和鹽處理后的根冠比與鹽害指數(shù)里顯著負相關(guān)；小麥種質(zhì)芽期與苗期的耐鹽性沒有

3、直接關(guān)系。 2．對小麥地方品種36號群體進行SSR遺傳多樣性分析，共檢測到26個等位變異，每個SSR位點的變異范圍為2～3個，平均每對引物的等位變異為2.36個。每對SSR引物的多態(tài)信息含量的范圍為0.071～0.512，平均為0.26?？梢钥闯?，小麥地方品種群體內(nèi)部單株之間的遺傳變異程度比較小，需要利用一種變異廣泛的標記來進行耐鹽基因構(gòu)成的分析。 3．利用生物信息學的方法，找到與耐鹽相關(guān)的基因，設(shè)計引物，最后篩選到依據(jù)

4、DREB片段設(shè)計的引物，通過PCR-SSCP技術(shù)對耐鹽鑒定呈中間型的22個群體進行基因構(gòu)成的分析，結(jié)果得到了18種帶型，共17個單核苷酸突變位點，其中12個位點為轉(zhuǎn)換，3個為顛換，1個為插入，1個為缺失。作物的耐鹽性是多基因控制一個較為復(fù)雜的數(shù)量性狀，單從DREB基因的單核苷酸多態(tài)性情況還不能完全解釋小麥的耐鹽性。 4．以鹽處理的小麥為材料，利用RT-PCR的方法克隆出DREB基因的編碼區(qū)，與發(fā)表的小麥DREB基因有99％的同源