反芻動(dòng)物飼用乳酸菌和酵母菌的篩選及其對(duì)瘤胃發(fā)酵影響的研究.pdf

1、青貯飼料和酒糟飼料是反芻動(dòng)物常見(jiàn)的粗飼料，其中富含乳酸菌、酵母菌，從中分離優(yōu)化篩選出優(yōu)質(zhì)菌株可作為反芻動(dòng)物飼用乳酸菌、酵母菌具有重要的實(shí)際意義。本論文研究從青貯飼料和酒糟飼料中分別篩選乳酸菌和酵母菌及其對(duì)人工瘤胃發(fā)酵的影響。 試驗(yàn)一，青貯飼料中飼用乳酸菌的分離、鑒定和優(yōu)化篩選試驗(yàn)。從青貯飼料中篩選出3株乳酸菌，在不同溫度、初始pH值和瘤胃液含量3個(gè)因素3個(gè)水平下進(jìn)行正交試驗(yàn)。結(jié)果表明，培養(yǎng)基中添加葡萄糖2％、蛋白胨1％，添加菌液

2、量為3％，100mL三角錐形瓶裝液量為40mL，在溫度36℃、初始pH值為5.8、瘤胃液含量達(dá)20％條件下，培養(yǎng)24h后測(cè)定生物量，其中1號(hào)菌株生物產(chǎn)量最高，經(jīng)過(guò)中科院微生物所生理生化鑒定和基因測(cè)序結(jié)果可知，1號(hào)菌為乳酸菌屬的屎腸球菌(Enterococcus Faecium)。 試驗(yàn)二，青貯飼料和酒糟飼料中飼用酵母菌的分離、鑒定和優(yōu)化篩選試驗(yàn)。從青貯飼料和酒糟飼料中分離10株酵母菌。通過(guò)正交試驗(yàn)的優(yōu)化篩選以及生長(zhǎng)曲線的測(cè)定，得

3、出屬于酵母屬的10號(hào)菌株在溫度30℃、初始pH值為5、葡萄糖濃度2％、大豆蛋白胨濃度1％、麥芽汁粉0.3％，酵母膏0.3％、接菌量3％，轉(zhuǎn)速180 r/min，培養(yǎng)48h時(shí)，生物產(chǎn)量達(dá)到最高，細(xì)胞蛋白達(dá)到60.54mgN/dL，菌體細(xì)胞達(dá)到1.7×109 cell/mL。此菌經(jīng)過(guò)中科院微生物所鑒定10號(hào)菌為釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)。 試驗(yàn)三，Enterococcus Faecium和Sacc

4、haromyces cerevisiae人工瘤胃體外發(fā)酵試驗(yàn)。采用完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分成3個(gè)處理組：1)添加控制日糧為對(duì)照組(CK)：2)5×107cell·g-1E.Faecium或者4×107 cell·g-1 S.cerevis(TR1)；3)2.5×108 cell·g-1 E.Faecium或者2.0×108 cell·g-1 S.cerevisiae(TR2)。通過(guò)對(duì)瘤胃pH值、NH3-N濃度、微生物蛋白(MCP)和揮發(fā)性脂

5、肪酸(VFA)的測(cè)定結(jié)果研究Enterococcus Faecium和Saccharomyces cerevisiae對(duì)人工瘤胃發(fā)酵的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，添加E.Faecium對(duì)瘤胃pH值和MCP沒(méi)有影響(P＞0.05)；添加E.Faecium能夠顯著提高瘤胃NH3-N濃度(P＜0.01)；E.Faecium添加組(5×107cell.g-1)顯著提高了總揮發(fā)性脂肪酸與乙酸的濃度(P＜0.05)，而添加E.Faecium對(duì)瘤胃丙酸、丁酸

6、和乙酸與丙酸比例沒(méi)有影響(P＞0.05)。結(jié)果表明添加一定量的E.Faecium，可在不改變瘤胃發(fā)酵類型的情況下，促進(jìn)飼料中碳水化合物的消化。添加S.cerevis對(duì)瘤胃pH值和NH3-N濃度沒(méi)有影響(P＞0.05)；S.cerevis對(duì)總揮發(fā)性脂肪酸、乙酸、丁酸和乙酸與丙酸比例沒(méi)有影響(P＞0.05)。研究結(jié)果表明，S.cerevis對(duì)瘤胃發(fā)酵的影響不大。通過(guò)對(duì)兩種菌的對(duì)比，可以看出，E.Faecium對(duì)瘤胃早期發(fā)酵內(nèi)環(huán)境各項(xiàng)指標(biāo)影響