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1、后基因組時(shí)代,表達(dá)譜基因芯片技術(shù)被廣泛應(yīng)用。表達(dá)譜基因芯片的實(shí)驗(yàn)技術(shù)的研究已經(jīng)成熟,而尋找差異表達(dá)基因的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法和表達(dá)譜芯片數(shù)據(jù)的生物信息學(xué)分析方法雖然有一定的發(fā)展,但是還存在很多的不足。本研究以豬胎盤(pán)發(fā)育后期表達(dá)譜基因芯片數(shù)據(jù)為研究對(duì)象,采用了方差分析法和貝葉斯法兩種方法進(jìn)行了差異表達(dá)基因的篩選,并利用芯片數(shù)據(jù)進(jìn)行了基因注釋,聚類分析,Pathway分析。本研究的主要結(jié)果如下:
1.運(yùn)用方差分析法對(duì)豬胎盤(pán)發(fā)育后期差異表
2、達(dá)基因進(jìn)行了篩選。其中,胎盤(pán)發(fā)育75天的二花臉豬(E75)和大白豬(L75)中篩選到胎盤(pán)差異表達(dá)基因90個(gè),二花臉豬相對(duì)大白豬上調(diào)表達(dá)的有35個(gè),下調(diào)表達(dá)的有55個(gè);胎盤(pán)發(fā)育90天的二花臉(E90)和大白豬(L90)中篩選到差異表達(dá)基因319個(gè),二花臉豬相對(duì)大白豬上調(diào)表達(dá)的有135個(gè),下調(diào)表達(dá)的有184個(gè)。
2.運(yùn)用貝葉斯方法對(duì)豬胎盤(pán)發(fā)育后期差異表達(dá)基因進(jìn)行了篩選。E75和L75中篩選到差異表達(dá)基因271個(gè),二花臉豬相對(duì)大
3、白豬上調(diào)表達(dá)的有108個(gè),下調(diào)表達(dá)的有163個(gè);E90和L90中篩選到差異表達(dá)基因538個(gè),其中二花臉豬相對(duì)大白豬上調(diào)表達(dá)的有256個(gè),下調(diào)表達(dá)的有282個(gè)。
3.對(duì)兩種統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行了比較研究。將E75和L75組中使用方差分析法篩選到的90個(gè)差異表達(dá)基因和使用貝葉斯方法篩選到的271個(gè)基因進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),兩種方法都包含的基因有61個(gè)。將E90和L90組中使用方差分析法篩選到的319個(gè)差異表達(dá)基因和使用貝葉斯方法篩選到的538
4、個(gè)基因比較發(fā)現(xiàn),兩種方法都包含的基因有247個(gè)。
4.差異表達(dá)的基因按照分子功能進(jìn)行分類的結(jié)果顯示,E75和L75組中,主要的類別有細(xì)胞生理過(guò)程(58.6%),細(xì)胞通信(22.5%),信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(20%),發(fā)育(16.7%),以及器官生理過(guò)程(16.7%)。E90 and L90組中,主要的類別有細(xì)胞通信(21.6%),信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(19.2%),發(fā)育16.1%),器官生理過(guò)程(14.1%),以及生物多聚體修飾(10.2%)。<
5、br> 5.聚類分析結(jié)果顯示不同的發(fā)育時(shí)期先聚,然后不同的品種再聚。而基因則分成6個(gè)具有相似表達(dá)模式的類別。
6.挑選了9個(gè)基因?qū)煞N分析方法(方差法和貝葉斯法)進(jìn)行了Q-PCR驗(yàn)證。其中,方差分析法分析結(jié)果中有8個(gè)基因(ALDH1A1,DIO3,DIRAS3,PON2,ASCL2,WIF1,VEGF,DCN)具有顯著性,SLC38a4沒(méi)有顯著性;貝葉斯方法分析結(jié)果中有6個(gè)基因(ALDH1A1,DIO3,DIRAS3
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